一、+G_z暴露后大鼠相关血管活性物质的变化（论文文献综述）
安雪晶[1]（2021）在《基于酸敏感离子通道研究针刺预防性治疗偏头痛CSD模型鼠的机制》文中研究表明目的:本研究旨在观察CSD时期酸敏感离子通道（ASICs）的变化规律以及针刺预处理效应,从抑制酸敏感离子通道激活的角度研究针刺预防性治疗偏头痛的机制。方法:将SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺预处理组、西药预处理组,其中以针刺预处理组于CSD造模前14天对阳陵泉、太冲穴予以电针刺激,强度1m A,疏密波,2/15Hz,20分钟,1次/天;西药预处理组于CSD造模前14天予盐酸氟桂利嗪20mg/kg腹腔注射,1次/天;空白组、假手术组和模型组除每日抓取外不做任何干预。除空白组,各组均在14天后进行麻醉,假手术组用0.9%Nacl刺激硬脑膜,余组均以1mol/L KCL刺激硬脑膜法复制偏头痛CSD模型,应用Western Blot和免疫荧光法检测各组大鼠偏头痛侧脑皮层中ASIC1和三叉神经脊束核中ASIC3蛋白的含量;应用免疫组化法观察各组大鼠偏头痛侧三叉神经节及三叉神经脊束核中CGRP的蛋白分布情况;应用ELISA法检测各组大鼠血清中5-HT及CGRP的含量。结果:（1）针刺预处理对偏头痛CSD模型鼠皮层ASIC1及三叉神经脊束核中ASIC3含量的影响:（1）Western Blot检测大鼠皮层中ASIC1的含量,结果显示:空白组和假手术组与模型组含量有统计学差异（P<0.05）;西药预处理组和模型组相比有统计学差异（P<0.05）,针刺预处理组和模型组相比虽无统计学差异（P>0.05）,但是针刺预处理组皮层中ASIC1含量少于模型组,有下降的趋势。针刺预处理组、西药预处理组两组相比组间虽无统计学差异,但针刺预处理组与西药预处理组比ASIC1含量有进一步下降的趋势。（2）免疫荧光检测大鼠皮层中ASIC1结果显示:目标抗体ASIC1在大鼠脑皮层中呈绿色。可明显观察到目标抗体ASIC1在各组大鼠皮层中的表达情况,其图像显示与蛋白含量测定结果一致,在空白组正常鼠和假手术组大鼠皮层中ASIC1也有表达,而偏头痛CSD模型鼠,ASIC1在鼠皮层中的表达更为密集,数量明显增多,两组预处理组由图可知分布较模型组明显减少,范围也比模型组分散。（3）Western Blot检测大鼠三叉神经脊束核中ASIC3的含量。结果显示:空白组、假手术组与模型组有统计学差异（P<0.05）。西药预处理组和针刺预处理组与模型组相比虽无统计学差异（P>0.05）,但是两组干预组鼠三叉神经脊束核中ASIC3的含量较模型组相比有进一步下降的趋势。西药预处理组和针刺预处理组组间无统计学差异（P>0.05）,但针刺预处理组ASIC3的含量较西药预处理组相比有下降的趋势。（4）免疫荧光检测大鼠三叉神经脊束核中中ASIC3结果显示:可明显观察到目标抗体ASIC3在各组大鼠中的表达情况,其图像显示分布结果与蛋白含量测定结果一致,在空白组正常鼠和假手术大鼠中ASIC3也有表达,而偏头痛CSD模型组大鼠,ASIC3在鼠三叉神经脊束核中的表达更为密集,数量明显增多,针刺预处理组和西药预处理组两组,ASIC3的表达呈现出散在的,甚至有缩小的趋势。（2）针刺预处理对偏头痛CSD模型鼠CGRP在三叉神经节及三叉神经脊束核中表达的影响:（1）免疫组化结果显示:CGRP在空白组正常大鼠和假手术组大鼠的三叉神经节中存在表达,免疫组化染色评分结果显示,模型组、针刺预处理组、西药预处理组的表达均高于空白组和假手术组（P<0.05）,模型组染色强度明显高于针刺预处理组和西药预处理组。两组干预组中的染色强度呈现出针刺预处理组、西药预处理组依次递减的趋势（2）免疫组化结果显示,CGRP在空白组正常大鼠和假手术组大鼠的三叉神经脊束核中存在表达,免疫组化染色评分结果显示,模型组、针刺预处理组、西药预处理组的表达均高于空白组和假手术组（P<0.05）,模型组染色强度对比针刺预处理组和西药预处理组显着增强,两组干预组中染色强度呈现出西药预处理组、针刺预处理组依次递减的趋势。（3）针刺预处理对偏头痛CSD模型鼠血清中5-HT、CGRP含量的影响::（1）酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中5-HT的含量,结果表明:空白组和假手术组与模型组存在统计学差异（P<0.05）,5-HT含量均明显高于模型组（P<0.05）。西药预处理组和针刺预处理组与模型组相比有统计学差异（P<0.05）,且5-HT含量均高于模型组（P<0.05）;针刺预处理组、西药预处理组两组干预组相比组间无统计学差异（P>0.05）,但是针刺预处理组较西药预处理组相比5-HT的含量有进一步上升的趋势。并且针刺预处理组和西药预处理组与空白组相比有统计学差异（P<0.05）。（2）酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中CGRP的含量,结果显示:空白组与假手术组无统计学差异（P>0.05）,CGRP含量均低于模型组（P<0.05）。针刺预处理组、西药预处理组两组干预组相比组间虽无统计学差异,但针刺预处理组与西药预处理组比CGRP含量有进一步减少和下降的趋势,并且与空白组相比亦无统计学差异（P>0.05）,针刺预处理组和西药预处理组的CGRP含量均少于模型组（P<0.05）。结论:1.针刺太冲、阳陵泉穴后与盐酸氟桂利嗪均可预防CSD的产生。2.针刺预处理太冲穴、阳陵泉穴与盐酸氟桂利嗪可能通过抑制CGRP的释放、降低血清中CGRP的含量、增加血清中5-HT的含量,减少皮层ASIC1和三叉神经脊束核ASIC3蛋白含量、抑制三叉神经节及三叉神经脊束核中的CGRP蛋白的表达、通过良性调节ASICs来预防CSD的产生。
白晓平[2]（2021）在《针刺预防性治疗对CSD模型大鼠脑皮质线粒体呼吸链功能的影响》文中研究表明目的:实验以皮层扩散性抑制（CSD）模型大鼠为研究对象,从线粒体的形态结构及呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ的活性角度出发,探讨针刺预防性治疗偏头痛的机制,为针刺预防治疗偏头痛提供科学依据。方法:选用健康雄性SD大鼠,体重为200～250g,分为空白组、假手术组、模型组及针刺预处理组、西药预处理组,按照随机数字表法,分为每组8只。针刺预处理组于造模前14天在太冲、阳陵泉穴处采用电针刺激（疏密波,2/15Hz,1m A,20min/次,1次/天）。西药预处理组于造模前14天予盐酸氟桂利嗪胶囊腹腔注射（20mg/kg,1次/天）。除空白组、假手术组外,各组在干预14天后造模（CSD模型）,进行无创血流检测后即刻取颈静脉血,断头取脑。本实验采用透射电镜观察CSD模型大鼠患侧额叶皮层线粒体形态与结构,采用酶学方法检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ的活性,采用免疫荧光法测患侧皮层及三叉神经脊束核的C-fos表达、微板法测定大鼠血清中的NO含量,并以皮层、三叉神经脊束核的C-fos表达及血清中NO含量作为效应指标。结果:1.透射电镜显示,模型组大鼠患侧皮层线粒体形态与结构存在中重度肿胀,形成空泡,提示其功能降低或消失,其线粒体异常百分比明显高于空白组和假手术组（P<0.05）,而空白组与假手术组相比无明显差异（P>0.05）。针刺与西药预处理组的线粒体异常百分比低于模型组（P<0.05）,而与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的线粒体异常百分比相比,差异无统计学意义（P>0.05）。2.针刺预处理对偏头痛模型大鼠皮层线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ活性的改善情况1)复合体Ⅰ活性结果:模型组的复合体Ⅰ活性低于空白组、假手术组（P<0.05）,而空白组与假手术组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅰ活性高于模型组（P<0.05）,而与空白组相对比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅰ活性相比,差异无统计学意义（P>0.05）。2)复合体Ⅱ活性结果:模型组的复合体Ⅱ活性低于空白组、假手术组,但差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅱ活性显着高于模型组（P<0.05）,而与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。干预组间的复合体Ⅱ活性相比,差异无统计学意义（P>0.05）。3)复合体Ⅲ活性结果:模型组的复合体Ⅲ活性低于空白组与假手术组,但差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅲ活性较模型组相比,具有升高的趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅲ活性相比,差异也无统计学意义（P>0.05）。4)复合体Ⅳ活性结果:模型组的复合体Ⅳ活性显着低于空白组（P<0.05）,但与假手术组无统计学差异（P>0.05）,而空白组与假手术组相比（P<0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅳ活性高于模型组（P<0.05）,但与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅳ活性相比,差异无统计学意义（P>0.05）。5)复合体Ⅴ活性结果:模型组的复合体Ⅴ活性低于空白组与假手术组（P<0.05）,而空白组与假手术组相比,差异具有统计学意义（P<0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅴ活性高于模型组（P<0.05）,而与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的复合体Ⅴ活性相比,差异无统计学意义（P>0.05）。3.针刺预处理对偏头痛模型大鼠皮层及三叉神经脊束核C-fos表达、血清中NO含量的改善情况1)血清中的NO含量结果:模型组的NO含量明显高于空白组、假手术组（P<0.05）,而空白组与假手术组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的NO含量均低于模型组（P<0.05）,但与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组血清中的NO含量相比,差异无统计学意义（P>0.05）。2)C-fos表达阳性细胞计数结果:模型组大鼠皮层及三叉神经脊束核中Cfos表达阳性细胞计数明显高于空白组、假手术组（P<0.05）,而空白组与假手术相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的C-fos表达阳性细胞计数低于模型组（P<0.05）,但与空白组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。针刺与西药预处理组的皮层及三叉神经脊束核中C-fos表达阳性细胞计数相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1)针刺与西药（盐酸氟桂利嗪）预处理均可抑制CSD的产生。2)针刺与西药（盐酸氟桂利嗪）抑制CSD的机制可能是通过保护线粒体结构,提高线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ活性,进而降低了CSD模型大鼠皮层、三叉神经脊束核中C-fos表达及血清中NO的含量。
侯季秋[3]（2021）在《从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究》文中进行了进一步梳理目的:通过临床文献研究明确中药治疗冠心病合并焦虑抑郁疾病对患者体内炎症因子水平及焦虑抑郁状态的影响,得出中药治疗对机体炎症因子表达量影响及对焦虑抑郁状态改善情况。通过实验研究探析慢性应激性情绪刺激对心肌梗死后大鼠体内CXC趋化性炎症反应的影响,及柴胡加龙骨牡蛎汤治疗心肌梗死合并焦虑大鼠炎症反应的效用机制。方法:研究一:根据主要检索词,在中国知网、维普数据库、万方数据库和PubMed、Cochrane Library进行检索,检索年份不限。由2名研究者根据纳入标准独自进行文献检索及筛选。并按照Cochrane’s Handbook提供的偏倚风险Risk of bias（ROB）量表对纳入的文献进行质量评价,采用GRADEpro系统对证据质量进行评级。使用Cochrane Revman 5.3软件进行数据录入、分析,采用相应的模型进行分析处理。对临床异质性大而不能进行合并分析的研究则仅进行描述性分析,最后用森林图表示结果。研究二:本研究采用21天不可应激性空瓶刺激方法建立焦虑模型,结扎冠脉左前降支方式建立心肌梗死模型,根据实验目的分别给予不同的干预方式,并分成假手术组、心梗组、复合模型组、抑制剂组、中药组,每组6～9只不等,采用心电图、心脏超声对心肌梗死大鼠造模成功与否及心功能进行评价,采用高架十字迷宫和旷场试验评价大鼠的行为学,进行HE、Masson、尼氏染色及透射电镜观察组织细胞形态变化,采用ELISA、免疫组化、Western-Blot、QPCR对靶点蛋白和基因进行检测。结果:研究一:本研究共纳入21篇研究文献,总样本量2342例,试验组1175例,对照组1167例。药物干预试验组Hs-CRP因子表达量均值低于对照组[SMD=-1.61,95%CI（-2.14,-1.00）,P<0.01];药物干预试验组IL-6因子表达量均值低于对照组[SMD=-43.31,95%CI（-45.55,-41.07）,P<0.01];药物干预试验组IL-8因子表达量均值低于对照组[SMD=-5.03,95%CI（-8.37,-1.70）,P=0.003];药物干预试验组 IL-17 因子表达量均值低于对照组[SMD=-33.27,95%CI（-40.15,-26.39）,P<0.01];药物干预试验组 TNF-α因子表达量均值低于对照组[SMD=-1.18,95%CI（-1.98,-0.38）,P=0.004];药物干预试验组患者焦虑状态的汉密尔顿量表评分均值低于对照组[SMD=-1.97,95%CI（-2.48,-1.46）,P<0.01]。研究二:实验一:（1）慢性应激刺激下心肌梗死大鼠骨髓中CXCL12的含量降低:复合模型组大鼠骨髓中CXCL12表达量明显低于假手术及心肌梗死组（P<0.05）;（2）慢性应激刺激下心肌梗死大鼠心肌组织CXCR4表达亢进:复合模型组大鼠梗死边缘区心肌组织CXCR4的IOD值高于假手术组和心肌梗死组（P<0.05）;（3）心肌梗死后CXCL12/CXCR4生物轴失衡加重炎症反应:复合模型组中性粒细胞弹性蛋白酶表达明显高于假手术及心肌梗死组（P<0.05）,复合模型组和心肌梗死组心肌纤维排列紊乱,细胞骨架结构消失并发生大面积坏死,大量中性粒细胞及其他炎症因子浸润。实验二:（1）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症蛋白表达:中药组与抑制剂组大鼠CXCR4蛋白表达量比复合模型组明显降低（P<0.05）,给予中药及抑制剂的大鼠组织内NF-κB、IL-1β、IL-18、GSDMD蛋白的表达与复合模型组大鼠相比有所下降（P<0.05）;（2）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症蛋白基因表达:复合模型组大鼠体内CXCR4、NLRP3、NF-κB、GSDMD蛋白基因表达明显高于假手术组（P<0.05）,中药组可明显抑制心肌梗死合并焦虑大鼠体内CXCR4、NLRP3、NF-κB、GSDMD蛋白基因表达量（P<0.05）;（3）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死边缘区组织相关炎症蛋白表达:与假手术组比较,复合模型组NLRP3、GSDMD免疫组化染色阳性率增高（P<0.05）,但中药组大鼠心肌梗死边缘区的NLRP3、GSDMD表达水平低于复合模型组（P<0.05）;（4）柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死后心脏功能:与假手术组比较,心肌梗死组和复合模型组LVEF%和LVFS%明显降低（P<0.05）,抑制剂组和中药组大鼠心脏LVEF%、LVFS%较复合模型组明显升高（P<0.05）,复合模型组及心肌梗死组大鼠的LVIDs、LVIDd比假手术组明显增加（P<0.05）,抑制剂组和中药组的LVIDd和LVIDs均比复合模型组下降（P<0.05）;（5）柴胡加龙骨牡蛎汤降低外周血中IL-1β和IL-18表达水平:与复合模型组和心肌梗死组相比,中药治疗后可降低外周血中IL-18、IL-1β水平（P<0.05）;（6）柴胡加龙骨牡蛎汤缓解大鼠的焦虑样行为,调节5-HT和DA蛋白表达:复合模型组大鼠进入开放臂次数和停留时间明显少于假手术组和心肌梗死组（P<0.05）,与复合模型组相比,给予中药或抑制剂的大鼠进入开放臂次数和停留时间增加（P<0.05）,复合模型组大鼠海马内焦虑相关神经递质5-HT和DA蛋白水平明显低于假手术组（P<0.05）,中药与抑制剂大鼠海马区5-HT和DA蛋白水平较复合模型组明显提高（P<0.05）。实验三:（1）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制海马组织主要炎症蛋白表达:复合模型组、心肌梗死组、中药组大鼠海马组织中NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18表达均高于假手术组（P<0.05）,与复合模型组相比,柴胡加龙骨牡蛎汤治疗组明显降低了心肌梗死合并大鼠脑部NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18 的表达量（P<0.05）;（2）柴胡加龙骨牡蛎汤改善海马区神经损伤:与复合模型组及心肌梗死组相比,中药组大鼠海马区尼氏阳性面积增加（P<0.05）;（3）柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死合并焦虑大鼠焦虑样行为:与假手术组相比,复合模型组大鼠OT%和OE%均明显下降（P<0.05）,复合模型组的大鼠水平运动得分和垂直运动得分均显着减少（P<0.05）,活动探索能力下降,中药组大鼠水平运动得分及垂直运动得分与复合模型组相比均有所增加（P<0.05）,活动及探索能力提高。结论:临床中采用中药治疗冠心病合并焦虑状态疗效显着且不良反应少,能够有效降低冠心病患者体内炎症因子的表达,缓解患者焦虑状态;活血化瘀法对冠心病合并焦虑抑郁患者体内Hs-CRP炎症因子的改善更具有优势。实验研究初步证明了心肌梗死合并焦虑大鼠体内骨髓及心肌梗死边缘区CXCL12/CXCR4生物轴表达失衡,CXCR4在心肌梗死急性期中表达明显上调,炎症反应亢进,心肌梗死边缘区心肌组织发生更多炎症因子浸润;而CXCR4表达亢进诱导的CXCR4/NFκB/GSDMD炎症信号通路激活,柴胡加龙骨牡蛎汤可能通过降低CXCR4的过表达,抑制CXCR4/NFκB/GSDMD炎症信号通路激活,减轻心肌组织炎症因子浸润,促进心肌梗死边缘区心肌细胞修复,改善心功能;同时,心肌梗死合并焦虑大鼠皮层及海马区相关炎症蛋白表达上调,柴胡加龙骨牡蛎汤可降低心肌梗死后皮层及海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 炎症因子表达,调节脑神经递质 5-HT、DA合成,缓解心肌梗死大鼠的焦虑样行为。
王林[4]（2020）在《环境浓度NP长期暴露对雄性大鼠甲状腺功能与增生性病变的影响及锌硒茶干预研究》文中提出目的:1)分析环境浓度NP长期暴露是否会影响雄性大鼠甲状腺激素水平及功能的稳态,探讨雌激素受体与甲状腺素受体在NP致甲状腺疾病中的表达情况。2)分析锌硒茶摄入对环境浓度NP长期暴露而引起的雄性大鼠甲状腺功能损伤及增生性病变的干预作用,探讨锌硒茶对NP致甲状腺功能损伤的保护作用机制。方法:240只雄性SD大鼠共分为7组（空白对照组,0.4mg/kg/d,4mg/kg/d,40mg/kg/d NP暴露组,30μg/kg/d E2组,普通茶治疗组,锌硒茶治疗组）。每日按体重灌胃,灌胃量为5ml/kg/day,连续灌胃染毒34周,茶叶干预组染毒NP剂量与高剂量组相同,第18周开始进行茶叶干预。染毒组分两次剖杀取材（17周、34周）,茶叶干预组于第34周剖杀取材。解剖前对大鼠进行甲状腺B超检查,利用ELISA法检测血清FT3、FT4、TSH水平,高效液相色谱法检测甲状腺组织和血清NP蓄积水平。甲状腺左叶用于透射电镜观察超微组织结构、HE切片观察大鼠甲状腺组织损伤情况、免疫组化切片比较ERα、ERβ,TRα、TRβ蛋白的表达情况。甲状腺右叶使用高效液相色谱法检测甲状腺组织中NP蓄积含量及Western Blot法检测ERα、ERβ,TRα、TRβ、HMGB1蛋白的相对表达量。结果:1)染毒17周时,高剂量组大鼠血清FT3水平较空白对照组明显增加（P<0.05）;高剂量组大鼠甲状腺内有低回声区出现,甲状腺细胞出现细胞核畸形、线粒体肿胀、内质网扩张。随染毒剂量的增加,甲状腺组织及血清中蓄积的NP含量均不断增加,NP各暴露组甲状腺组织内及血清中的NP含量均明显高于空白对照组(P甲状腺<0.01,P血清<0.01);且随暴露剂量的增加,甲状腺滤泡细胞损伤情况不断加重,滤泡上皮厚度增加（P<0.01）,单个滤泡面积减少（P<0.01）,滤泡上皮复层情况明显,立方上皮细胞变扁平;与对照组相比,NP暴露组和E2组的ERα、ERβ、TRα和TRβ的IOD/Area明显高于空白对照组(PERα<0.01,PERβ<0.01,PTRα<0.01,PTRβ<0.01)。ERα、TRα和HMGB1蛋白的表达明显高于对照组(PERα<0.01,PTRα=0.05,PHMGB1<0.05)。并且甲状腺组织中ERα（r=0.66,P<0.01）,ERβ（r=0.57,P<0.01）,TRα（r=0.55,P<0.05）和HMGB1（r=0.80,P<0.01）蛋白的表达与甲状腺中NP含量呈正相关。2)染毒34周,高剂量组大鼠血清FT3水平较空白对照组明显增加,FT4水平明显降低(PFT3<0.05,PFT4<0.05);中、高剂量组均出现结节点,甲状腺细胞中细胞核有畸形、线粒体肿胀严重、内质网扩张明显并有囊泡化形成。血清及甲状腺组织中NP蓄积含量随暴露剂量的增加而增加,且明显高于空白组(P甲状腺<0.01,P血清<0.05);甲状腺细胞病理损伤严重,滤泡上皮厚度明显增多（P<0.01）,单个滤泡面积减少（P<0.01）,滤泡上皮复层化严重;与对照组相比,NP染毒组和E2组的ERα、ERβ、TRα和TRβ的IOD/Area明显高于空白对照组(PERα<0.01,PERβ<0.01,PTRα<0.01,PTRβ<0.01)。ERα、ERβ、TRα、TRβ和HMGB1的蛋白表达水平明显高于对照组(PERα<0.01,PERβ<0.01,PTRα<0.01,PTRβ<0.05,PHMGB1<0.01)。且大鼠甲状腺组织中ERα（r=0.57,P<0.01）,ERβ（r=0.73,P<0.01）,TRα（r=0.64,P<0.01）,TRβ（r=0.58,P<0.01）和HMGB1（r=0.74,P<0.01）的蛋白表达情况与甲状腺中NP含量呈正相关。3)第34周大鼠血清和甲状腺组织中NP的含量明显高于第17周,甲状腺滤泡上皮的厚度在第34周时也明显增加,且第34周大鼠甲状腺中ERα,ERβ,TRα,TRβ和HMGB1蛋白的表达水平明显高于第17周（P<0.05）。4)锌硒茶干预组并无高回声点存在,茶叶干预组甲状腺细胞病理损伤较高剂量组有所减轻,滤泡上皮厚度明显降低（P<0.01）;茶叶干预后ERα、ERβ、TRα和TRβ相对表达量均较高剂量组有所降低(PERα<0.01,PERβ<0.01,PTRα<0.01)。结论:1、环境剂量NP长期暴露后会在甲状腺组织及血液中蓄积,可导致大鼠甲状腺组织结构及激素水平等发生改变、增生性病变的发生、雌激素受体和甲状腺素受体蛋白的相对表达量明显增加。初步认为激素受体的表达增加是NP致甲状腺功能紊乱的机制之一。2、摄入锌硒茶可有效降低NP暴露大鼠甲状腺组织中ERα、ERβ、TRα、TRβ蛋白的表达,并对NP引起的甲状腺损伤起保护作用。
魏萌萌[5]（2020）在《有机阴离子转运体（Oats）和糜酶/AngⅡ在阿德福韦所致慢性肾损伤和甲氨蝶呤所致急性肾损伤中的作用》文中研究表明目的药源性肾损伤已经成为临床中最常见的药源性疾病,其病理学变化主要表现为肾小管损伤、肾间质损伤或者肾小管和肾间质共同损伤,探明药源性肾损伤的机制和影响因素对于其临床诊治意义重大。转运体和肾脏微血流对于药物在肾脏的清除具有重要影响,且与肾损伤密切相关,而糜酶/AngⅡ是影响肾脏微血流的重要因素。因此,本实验结合细胞实验和动物实验对Oats和糜酶/AngⅡ在阿德福韦所致慢性肾损伤和甲氨蝶呤所致急性肾损伤中的作用进行了探究。方法（1）大鼠随机分为对照组、阿德福韦组、阿德福韦+丙磺舒组、阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组、阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组。对照组给予空白溶剂0.5%CMC-Na（1 mL/100g,i.g.）和生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）,其余组分别对应给予阿德福韦（10 mg/kg,i.g.）+生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）、阿德福韦（10mg/kg,i.g.）+丙磺舒（30 mg/kg,i.g.）+生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）、阿德福韦（10 mg/kg,i.g.）+丙磺舒（30 mg/kg,i.g.）+色甘酸钠（25 mg/kg,i.p.）、阿德福韦（10 mg/kg,i.g.）+丙磺舒（30 mg/kg,i.g.）+缬沙坦（50 mg/kg,i.g.）+生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）,每日1次,给药周期为2周和4周,于末次给药2 h后,采用微透析技术收集1 h的肾间质透析液,随后腹主动脉采血,并收集肾脏组织。将获得的样品相应处理后,采用LC-MS/MS测定大鼠血液、肾脏组织及肾间质中阿德福韦浓度;采用ELISA试剂盒测定血液和肾间质中AngⅡ浓度;采用全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐、尿素氮、胱抑素C含量;通过甲苯胺蓝染色、苏木精-伊红染色（HE）及CD31-免疫荧光技术分别考察大鼠肾间质肥大细胞、肾脏组织病理学及肾脏微血管的变化情况;采用Western blotting测定肾脏组织Oat1、Oat3、Mrp2及Mrp4的表达。（2）阿德福韦干预RBL-2H3细胞后检测细胞糜酶释放量。（3）大鼠随机分为对照组、甲氨蝶呤组、甲氨蝶呤+吲哚美辛组以及吲哚美辛组,对照组给予空白溶剂生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）和纯化水（1 mL/100g,i.g.）,其余组分别对应给予甲氨蝶呤（360 mg/kg,i.p.）+纯化水（1 mL/100g,i.g.）、甲氨蝶呤（360 mg/kg,i.p.）+吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）以及吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）+生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）,单次给药48 h后收集4 h尿液,给药72 h后腹主动脉采血,并采集肾脏组织。将获得的样品相应处理后,采用HPLC测定大鼠肾脏甲氨蝶呤浓度;采用ELISA试剂盒测定血液中AngⅡ浓度;全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐、尿素氮及尿液中胱抑素C、白蛋白的含量;通过甲苯胺蓝染色、HE分别考察大鼠肾间质肥大细胞、肾脏组织病理学的变化情况;采用Western blotting测定肾脏组织Oat1、Oat3、Mrp2及Mrp4的表达。（4）大鼠按照（3）项下相同方法分组和给药,单次给药72 h后收集1 h的肾间质透析液,采用ELISA试剂盒测定肾间质AngⅡ浓度。（5）甲氨蝶呤和吲哚美辛分别干预RBL-2H3细胞后检测细胞糜酶释放量。（6）大鼠随机分为对照组、甲氨蝶呤组、甲氨蝶呤+色甘酸钠组、甲氨蝶呤+吲哚美辛组、甲氨蝶呤+吲哚美辛+色甘酸钠组、吲哚美辛组以及吲哚美辛+色甘酸钠组,对照组给予空白溶剂生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）和纯化水（1mL/100g,i.g.）,其余组分别给予甲氨蝶呤（360 mg/kg,i.p.）+纯化水（1 mL/100g,i.g.）、甲氨蝶呤（360 mg/kg,i.p.）+纯化水（1 mL/100g,i.g.）+色甘酸钠（50 mg/kg,i.p.）、甲氨蝶呤（360 mg/kg,i.p.）+吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）、甲氨蝶呤（360mg/kg,i.p.）+吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）+色甘酸钠（50 mg/kg,i.p.）、吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）+生理盐水（0.25 mL/100g,i.p.）、吲哚美辛（10 mg/kg,i.g.）+色甘酸钠（50 mg/kg,i.p.）,单次给药48 h后收集4 h尿液,给药72 h后腹主动脉采血。运用全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐、尿素氮及尿液中胱抑素C、白蛋白的含量。结果（1）大鼠给药2周后,与对照组相比,阿德福韦+丙磺舒组肾间质肥大细胞数目显着增多（P<0.05）,肾微血管丢失严重,血中AngⅡ的浓度显着增加（P<0.05）,肾间质中AngⅡ的浓度有所增加但无显着性差异;与阿德福韦+丙磺舒组相比,阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组和阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组肾间质肥大细胞数目显着减少（P<0.05）,阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组血和肾间质中AngⅡ的浓度均有所降低但无显着性差异,而阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组血和肾间质中AngⅡ的浓度均无显着变化;与阿德福韦+丙磺舒组相比,阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组和阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组肾微血管丢失缓解,血清中肌酐、尿素氮、胱抑素C含量均无显着变化,肾间质纤维化减轻,阿德福韦在血液和肾脏中的浓度显着降低（P<0.05/0.01）,在肾间质透析液中的浓度呈降低趋势但无统计学差异。此外,相比于阿德福韦+丙磺舒组,阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组肾脏组织中转运体Oat1、Mrp2、Mrp4蛋白表达无显着变化,Oat3蛋白表达显着增加（P<0.05）,阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组Oat1、Oat3蛋白表达显着增加（P<0.05/0.01）,Mrp4蛋白表达增加但无统计学差异,Mrp2蛋白表达无显着变化。大鼠给药4周后,与对照组相比,阿德福韦+丙磺舒组肾间质肥大细胞数目显着增多（P<0.05）,肾微血管丢失严重,血和肾间质中AngⅡ浓度非常显着性增加（P<0.01）;与阿德福韦+丙磺舒组相比,阿德福韦+丙磺舒+色甘酸钠组肾间质肥大细胞数目显着减少（P<0.05）,血和肾间质中AngⅡ浓度非常显着性降低（P<0.01）,肾微血管丢失明显缓解,肾间质纤维化减轻,血清中肌酐和胱抑素C含量显着降低（P<0.05）,尿素氮无显着变化,阿德福韦在肾脏组织、肾间质透析液及血液中的浓度均显着降低（P<0.05/0.01）,肾脏组织摄取型转运体Oat1和Oat3蛋白表达量非常显着性增加（P<0.01）,外排型转运体Mrp4蛋白表达也有所增加但无显着性差异,Mrp2蛋白表达无显着变化;与阿德福韦+丙磺舒组相比,阿德福韦+丙磺舒+缬沙坦组肾脏肥大细胞数目显着减少（P<0.05）,血和肾间质中AngⅡ的浓度无显着变化,肾微血管丢失明显缓解,肾间质纤维化减轻,血清中肌酐、尿素氮和胱抑素C含量均无显着变化,阿德福韦在肾脏组织、肾间质透析液及血液中的浓度均显着降低（P<0.05/0.01）,肾脏组织摄取型转运体Oat1和Oat3及外排型转运体Mrp4蛋白表达量显着增加（P<0.05/0.01）,Mrp2蛋白表达无显着变化。（2）阿德福韦干预下RBL-2H3细胞糜酶的释放具有时间依赖性和浓度依赖性。（3）大鼠单次给药后,与对照组和甲氨蝶呤相比,甲氨蝶呤+吲哚美辛组尿量显着降低（P<0.05/0.01）,血清中尿素氮显着增高（P<0.05/0.01）,肾小管萎缩明显,肾脏肥大细胞数目显着增高（P<0.05）;与甲氨蝶呤组相比,甲氨蝶呤+吲哚美辛组肾脏药物浓度显着增高（P<0.05）;与对照组相比,甲氨蝶呤+吲哚美辛组和吲哚美辛组肾间质中AngⅡ的浓度非常显着性增高（P<0.01）,甲氨蝶呤组肾间质中AngⅡ的浓度无显着变化;与甲氨蝶呤+吲哚美辛组相比,吲哚美辛组大鼠肾间质透析液中AngⅡ浓度非常显着性增高（P<0.01）;与对照组和吲哚美辛组相比,甲氨蝶呤+吲哚美辛组摄取型转运体Oat1、Oat3蛋白表达显着增加（P<0.05/0.01）,外排型转运体Mrp2蛋白表达非常显着性降低（P<0.01）,Mrp4蛋白表达非常显着性增加（P<0.01）。（4）甲氨蝶呤或吲哚美辛干预RBL-2H3细胞后,糜酶的释放均具有时间依赖性和浓度依赖性。（5）与甲氨蝶呤+吲哚美辛组相比,甲氨蝶呤+吲哚美辛+色甘酸钠组大鼠尿量、血清中尿素氮、肌酐含量及尿液中白蛋白和胱抑素C含量均无显着变化。结论（1）抑制Oats导致的阿德福韦在肾间质的长期蓄积能够促进大鼠肾间质肥大细胞募集,促使其糜酶释放量增加,进而引起肾脏AngⅡ生成增多,导致肾脏微血管丢失,并可能引起组织缺血缺氧,最终引发肾损伤;肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠和AngⅡ受体拮抗剂缬沙坦分别通过抑制肥大细胞的糜酶释放和拮抗AngⅡ生理效应的发挥,显着减少了肾脏微血管丢失,同时促进了介导阿德福韦转运的Oat1、Oat3及Mrp4的蛋白表达,加速了阿德福韦在肾脏的清除,有效地防止了阿德福韦肾间质的蓄积,缓解了阿德福韦所致肾损伤。（2）甲氨蝶呤合用非甾体抗炎药吲哚美辛后,大鼠肾脏摄取型转运体Oat1和Oat3表达增加,外排型转运体Mrp2表达降低,提示甲氨蝶呤可能蓄积于肾小管上皮细胞而非肾间质中,从而引起肾小管损伤。此外,色甘酸钠对各组生化指标亦无改观,提示糜酶/AngⅡ并非甲氨蝶呤所致急性肾损伤的主要影响因素。
郑磊[6]（2020）在《血管重构在门脉高压症中的作用机制研究》文中指出第一部分:门静脉高压症与动脉重构目的:探索肝硬化和非肝硬化门静脉高压症模型中是否存在血管重构表型。方法:分别采用CCl4吸入诱导肝硬化和PPVL手术诱导非肝硬化门静脉高压症大鼠模型,判定其成模情况后检测肠系膜血管重构表型。结果:两种模型平均动脉压均降低,门静脉压力均升高,肝脏组织学显示肝硬化门静脉高压症大鼠肝脏明显硬化改变,非肝硬化组大鼠肝脏无明显差别。在肝硬化门静脉高压症中肠系膜动脉变薄,非肝硬化门静脉高压症中无明显改变。结论:两种模型造模是成功的。肝硬化门静脉高压症模型存在显着动脉重构表型,非肝硬化门静脉高压症模型中不存在此表型。第二部分:门静脉高压症动脉重构的结构表现目的:阐明门静脉高压症动脉重构的血管成分异常。方法:通过电镜、WB、免疫组化和荧光检测肠系膜动脉主要结构相关蛋白的表达。结果:门静脉高压症大鼠肠系膜动脉中血管内皮凹凸不平,内皮细胞发生脱落,p-e NOS表达增多,钙调蛋白、弹性蛋白和α-SMA表达减少。结论:肠系膜动脉重构的主要改变以内皮细胞脱落、基底膜间隙增宽、收缩蛋白（钙调蛋白、弹性蛋白、α-SMA）表达减少,扩张蛋白p-e NOS表达增多。第三部分:VEGFR-3与门静脉高压症动脉重构目的:研究VEGFR-3与肠系膜动脉重构的关系。方法:运用PCR和免疫荧光检测门静脉高压症的肠系膜动脉相关基因和蛋白表达。结果:门静脉高压症的大鼠肠系膜动脉上VEGF-D和VEGFR-3表达增多,同时Ki-67增殖信号和cleaved caspase-3凋亡信号表达增多。结论:在门静脉高压症的肠系膜动脉重构中,VEGFR-3信号表达增加,其配体VEGF-D表达同时增加。血管增殖和凋亡信号均有所增加,但血管平滑肌细胞凋亡明显。第四部分:抑制VEGFR-3与门静脉高压症动脉重构目的:证明抑制VEGFR-3信号能够改善门静脉高压症中肠系膜动脉重构。方法:运用VEGFR-3抑制剂MAZ-51治疗门静脉高压症大鼠后检测重构表型。结果:两组大鼠门静脉压力、平均动脉压和VEGFR-3表达无明显差异,MAZ-51改善门静脉高压症大鼠肠系膜动脉重构,血管厚度和面积增加,肠系膜动脉平滑肌细胞凋亡减少。结论:运用VEGFR-3抑制剂MAZ-51能够通过减少肠系膜动脉平滑肌细胞凋亡,缓解门静脉高压症的肠系膜动脉重构。第五部分:VEGFR-3信号通路与门静脉高压症动脉重构目的:初探VEGFR-3信号在肠系膜动脉上内皮细胞层的信号通路。方法:原代分离肠系膜动脉内皮细胞,运用不同时间和浓度VEGF-D刺激内皮细胞,以及MAZ-51联合VEGF-D刺激内皮细胞,检测相关蛋白表达。结果:随着VEGF-D刺激时间和浓度的增加,VEGFR-3下游信号磷酸化e NOS、AKT和ERK的表达逐渐增加,在10min和50ng/ml磷酸化程度最为显着。MAZ-51组较VEGF-D组,下游蛋白AKT、ERK和e NOS磷酸化程度明显减弱。结论:运用VEGFR-3抑制剂MAZ-51能够减少肠系膜动脉内皮细胞的VEGFR-3信号下游磷酸化AKT、ERK、e NOS的表达。
阴雪妍[7]（2020）在《腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB表达的影响》文中研究指明背景脑卒中已成为当前我国首位致残致死类疾病,其中缺血性脑血管病更是严重影响国民健康、生活。尽早恢复脑的血供、氧供对降低致残致死率意义非凡,然而,在血供、氧供恢复后可能出现更严重的损伤,即脑缺血-再灌注损伤,它的发生主要包括钙超载、炎症反应等损伤机制,其中炎症反应机制广受关注,作为调节炎症因子转录并引起靶基因表达增加的NF-κB成为研究热点。脑缺血药物预处理是指在脑再灌注损伤之前预先用药物诱导机体形成神经保护,以避免或减轻不可逆性损伤。腺苷作为机体重要的内源性活性物质,其信号传导是通过调节炎症反应、缺血性组织损伤和组织重构实现的。大量实验证实腺苷预处理能有效减轻大鼠脑血-再灌注损伤引起的神经功能缺损症状,完善其脑保护作用的分子机制研究对腺苷早日安全有效应用于临床预防脑缺血-再灌注损伤具有重要意义。目的通过观察腺苷预处理对脑缺血-再灌注损伤后大鼠脑内TNF-α和NF-κB的影响,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的分子保护机制。方法Sprague-Dawley大鼠60只随机分为假手术组（即用F组表示）、经腺苷预处理的大鼠脑缺血-再灌注组（即用AP组表示）和大鼠脑缺血-再灌注组（即用IR组表示）共3组,每组按照缺血-再灌注后2h、6h、24h、48h四个时间点随机分5只。采用MCAO法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。通过对以上3组脑缺血-再灌注48h后的大鼠脑组织行头颅MRI、HE染色以及对以上60只大鼠进行神经功能缺损评分,应用积分光密度软件系统通过免疫组织化学方法观察大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的平均积分光密度值来进一步验证腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的脑保护作用,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的分子保护机制。结果1.F组大鼠术后无神经功能缺损体征,AP组和IR组大鼠术后均出现明显神经功能缺损体征。AP组和IR组大鼠神经功能缺损评分显着高于F组,AP组大鼠经神经功能缺损评分结果提示分数明显比IR组低,且以上实验结果P<0.05,提示差异都具有统计学意义。2.F组大鼠术后MRI中T1WI、T2WI均未见明显异常,AP组和IR组大鼠脑梗死体积显着高于F组,AP组大鼠脑梗死体积显着低于IR组,IR组测量的脑梗死体积为（168.80±17.584）mm3,AP组测量的脑梗死体积为（66.80±7.694）mm3,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.光镜下48h F组大鼠海马区神经细胞排列整齐,神经元结构完整,核染色较淡,尼氏体丰富,神经基质无水肿;IR组神经元呈现坏死改变,结构模糊,胞体肿胀,细胞核和细胞浆界限不清,其周围出现宽大透亮区。在缺血梗死区域旁边的脑组织发生肿胀,神经胶质细胞显着增多,部分神经细胞出现细胞裂解、凋亡。AP组的HE染色改变与IR组相似,但比IR组较轻,细胞结构及组织层次相对完整。4.AP组和IR组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显着高于F组,AP组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显着低于IR组,统计学结果P<0.05,说明差异具有统计学意义。结论腺苷预处理可通过减少大鼠缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB的表达来减轻神经细胞损伤,达到其脑保护作用。
郝斌威[8]（2019）在《基质蛋白Tenascin-C介导TGF-β在生物燃料烟雾致大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用及机制研究》文中研究表明【研究背景】慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）是常见的呼吸系统疾病,其患病率高,危害范围广,严重威胁全球人类健康。慢阻肺危险因素众多,除烟草烟雾外,室内空气污染（特别是生物燃料来源烟雾）是其另一个重要的危险因素,越来越受到关注。慢阻肺发病机制复杂且病理表现多样,为一异质性疾病。生物燃料烟雾所致慢阻肺在临床表现和病理改变上与烟草烟雾所致慢阻肺有所区别,主要表现为小气道疾病,特别是在慢阻肺早期阶段。小气道纤维化为主的气道重塑是慢阻肺早期病理改变的主要特征,也是气流受限主要发生的部位。平滑肌细胞除作为结构细胞起收缩作用外,其增殖和分泌细胞外基质能力在气道重塑过程中起关键作用。细胞外基质的紊乱是小气道纤维化过程中重要一环,作为细胞外基质蛋白的一员,基质蛋白Tenascin-C（TNC）在慢阻肺患者小气道表达异常增加,但其具体如何参与慢阻肺的发生发展尚不清楚。生物燃料烟雾所致慢阻肺气道重塑中细胞外基质沉积报道甚少。TGF-β作为促纤维化因子,是否可以参与生物燃料烟雾导致慢阻肺气道重塑过程还有待进一步探讨。本课题从生物燃料烟雾致大鼠慢阻肺模型和体外生物燃料细颗粒物作用于培养人支气管平滑肌细胞两个水平上,探讨生物燃料对慢阻肺气道重塑,特别是细胞外基质沉积方面作用,另外进一步研究沉积基质蛋白TNC在慢阻肺发生发展中的作用,为理解生物燃料参与慢阻肺小气道重塑提供一定的理论基础。第一部分:TNC和TGF-β1在生物燃料烟雾致大鼠慢阻肺中表达增加目的生物燃料烟雾是慢阻肺危险因素之一,慢性气道炎症和小气道重塑是慢阻肺常见病理改变,细胞外基质沉积是小气道纤维化重要的环节。本部分主要探讨生物燃料烟雾慢性暴露对大鼠肺部形态学影响以及大鼠肺部和全身炎症反应和小气道细胞外基质沉积及TGF-β1表达的影响,并对大鼠肺部TGF-β1的表达与细胞外基质蛋白的表达进行相关性分析。方法24只雄性SD大鼠随机分为2组分别接受洁净空气和生物燃料烟雾暴露1个月和6个月,收集大鼠肺组织和血清。HE染色观察肺组织结构改变和气道重塑情况;多因子检测大鼠肺组织和血清细胞因子表达情况;免疫组化观察肺部TGF-β1表达和细胞外基质蛋白沉积;ELISA检测大鼠血清TNC蛋白表达和大鼠肺组织及血清TGF-β1蛋白表达。结果1.大鼠肺部形态学改变:生物燃料烟雾暴露6月后,大鼠肺泡平均间隔为（76.38±9.16μm）,小气道壁厚度为（18.45±1.43μm2/μm）,平滑肌层α-SMA蛋白表达为（2.38±0.15）,平滑肌层占气道厚度比值WA%为（11.77±1.18）%,相比洁净空气组大鼠平均肺泡间隔（50.95±1.31μm）明显增宽,小气道壁厚度（15.24±1.31μm2/μm）明显增厚,平滑肌层α-SMA蛋白表达（1.64±0.17）明显增加以及平滑肌层占气道厚度比值WA%（8.34±0.99）%明显增厚,差异有统计学意义（P值均小于0.05）。2.大鼠肺部炎症和血清炎症水平改变:生物燃料烟雾暴露1个月和6个月后,肺组织趋化因子MCP-1、MIP-1α、RANTES,炎症因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-17A以及IFN-γ相比洁净空气组明显增高;血清趋化因子G-CSF、MCP-1、MIP-1α、RANTES;炎症因子IL-1α、IL-2、IL-6、IL-13、IL-17A以及IFN-γ、VEGF相比洁净空气组明显增高。3.大鼠肺部和血清TGF-β1表达:a.血清ELISA结果显示:生物燃料烟雾暴露1个月和6个月大鼠血清TGF-β1表达分别为[（64.01±4.55 pg/m L）、（60.01±3.68 pg/m L）],相比洁净空气组[（49.53±2.67 pg/m L）、（49.42±2.07 pg/m L）]均增加,差异有统计学意义（P<0.05）。b.大鼠肺组织TGF-β1表达分别为[（29.83±2.13 pg/mg）、（31.11±2.13 pg/mg）],与洁净空气组[（23.75±1.99 pg/mg）、（21.16±2.69 pg/mg）]相比,暴露6个月后表达增加,差异有统计学意义（P<0.05）。c.大鼠肺组织免疫组化结果显示:在生物燃料烟雾暴露6个月后,大鼠小气道TGF-β1表达量为（13.21±0.84）,相比洁净空气组（10.19±0.75）表达增加,差异有统计学意义（P<0.05）。4.大鼠肺部细胞外基质蛋白改变:与6个月对照组相比,生物燃料烟雾暴露6月后大鼠小气道周围细胞外基质蛋白,包括糖蛋白TNC、FN、蛋白聚糖VCAN以及胶原I和胶原IV等沉积明显增多。（TNC:6.27±0.79 vs 3.26±0.55;VCAN:3.01±0.68 vs 3.24±0.54;FN:2.35±0.34 vs 0.93±0.25;Collagen I:9.18±1.16 vs4.12±0.61;Collagen IV:13.11±1.51 vs 8.55±1.02;P<0.05）,胶原III表达没有差异（10.23±1.49 vs 9.01±1.36;P>0.05）。5.大鼠肺部TGF-β1与细胞外基质蛋白相关性分析:TGF-β1表达与糖蛋白TNC、FN、蛋白聚糖VCAN以及胶原I、胶原IV显着相关,差异有统计学意义（P<0.05）,相关系数分别为（TNC:r=0.725,VCAN:r=0.711,FN:r=0.788,Collagen I:r=0.805,Collagen IV:r=0.830）;与胶原III相关性不明显,无统计性差异（P<0.05）小结:生物燃料烟雾慢性暴露6个月后可引起大鼠肺气肿和气道重塑,其中平滑肌细胞层增厚为主;同时伴随有慢性肺部炎症和全身系统性炎症发生,小气道周围TGF-β1表达增加及大量细胞外基质蛋白如TNC等沉积,且TGF-β1表达于基质蛋白表达增加显着相关。第二部分:生物燃料PM2.5对人支气管平滑肌细胞炎症的影响及机制目的慢性气道炎症是慢阻肺主要病理改变之一,支气管平滑肌细胞具有一定分泌炎症因子功能,本部分主要探讨生物燃料来源细颗粒物（BRPM2.5）对支气管平滑肌细胞分泌炎症中的作用及机制。方法不同浓度BRPM2.5不同时间点刺激HBSMC和16HBE细胞;分别以TGF-β中和抗体、TGF-β受体抑制剂、MAPK通路（ERK/P38）和AKt通路抑制剂等措施干预细胞,CCK8法检测BRPM2.5对HBSMC和16HBE细胞活力的影响;以实时荧光定量PCR和ELISA法分别检测IL6和IL8 m RNA和蛋白表达。结果1.不同浓度的BRPM2.5不同时间点作用于HBSMC可诱导IL6和IL8m RNA和蛋白表达增加:相比DMSO组,不同浓度的BRPM2.5（4μg/m L,8μg/m L）刺激HBSMC 72h后IL8 m RNA和蛋白表达增加,差异有统计学意义（P<0.05）。4μg/m L BRPM2.5刺激48h和72h相比同时间点DMSO组IL8表达明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）;4μg/m L BRPM2.5刺激16HBE细胞48或72h后,IL6 m RNA和蛋白表达相比DMSO组明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）;但8μg/m L BRPM2.5刺激后IL6表达未改变（P>0.05）。2.TGF-β中和抗体可抑制BRPM2.5诱导HBSMC IL8分泌:与BRPM2.5处理组相比:1μg/m L的TGF-β中和抗体预处理后BRPM2.5处理组IL6和IL8m RNA和蛋白表达均无差异（P>0.05）;10μg/m L的TGF-β中和抗体预处理后BRPM2.5处理组IL6 m RNA和蛋白表达无差异（P>0.05）,但IL8 m RNA和蛋白表达均降低,差异有统计学意义（P<0.05）。3.ALK5抑制剂和ERK1/2、P38、Akt通路抑制剂可抑制BRPM2.5诱导HBSMC IL6和IL8 m RNA和蛋白表达:相比BRPM2.5处理组,ALK5抑制剂和p38MAPK、Akt通路抑制剂预处理后BRPM2.5处理组,IL6 m RNA和蛋白表达显着下降,差异有统计学意义（P<0.05）;相比BRPM2.5处理组,ALK5抑制剂和ERK,p38MAPK通路抑制剂预处理后BRPM2.5处理组,IL8 m RNA和蛋白表达显着下降,差异有统计学意义（P<0.05）。4.BRPM2.5可促使16HBE细胞分泌TGF-β1表达增加,但不能促进HBSMC分泌TGF-β1表达增加:相比DMSO组,BRPM2.5处理组16HBE细胞TGF-β1蛋白表达显着增加,差异有统计学意义（P<0.05）;相比DMSO组,BRPM2.5处理组HBSMC TGF-β1蛋白表达无改变（P>0.05）。5.PCR结果证实BRPM2.5可下调细胞外基质蛋白TNC m RNA表达,上调VCAN m RNA表达,对其他细胞外基质蛋白m RNA表达无影响:相比对照组而言:BRPM2.5处理组TNC m RNA表达下调,VCAN m RNA表达上调,差异有统计学意义（P<0.05）;其他细胞外基质蛋白m RNA表达均无改变（P>0.05）。小结BRPM2.5可通过TGF-β/LAK5通路和非经典通路（ERK/P38/Akt）刺激支气管平滑肌细胞分泌IL6和IL8。BRPM2.5可促进上皮细胞释放TGF-β,但不能促使支气管平滑肌细胞释放TGF-β。第三部分:TNC参与TGF-β1诱导气道平滑肌细胞慢阻肺样病理改变目的平滑肌细胞增殖和分泌细胞外基质参与气道重塑过程,从而导致慢阻肺气流受限。本部分主要探讨TGF-β1对支气管平滑肌细胞（HBSMC）增殖和分泌细胞外基质蛋白及炎症因子的作用及机制,以及基质蛋白TNC在其中的作用及机制。方法1.TGF-β1刺激HBSMC,实时荧光定量PCR和免疫蛋白印迹检测细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I和α-SMA m RNA和蛋白表达。2.TGF-β1刺激HBSMC,免疫荧光和流式细胞术检测平滑肌细胞增殖;ELISA法检测细胞上清中炎症因子IL6和IL8表达。3.TGF-β受体ALK5抑制剂,以及ERK/P38/Akt通路抑制剂预处理,TGF-β1刺激后,实时荧光定量和免疫蛋白印迹分别法检测细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I和α-SMA m RNA和蛋白表达。4.运用si RNA技术沉默SMAD2/SMAD3和TNC表达后,TGF-β1作用HBSMC后,实时荧光定量PCR和免疫蛋白印迹分别检测TNC、FN、Collagen I和α-SMA m RNA和蛋白表达;免疫蛋白印迹检测TGF-β1转录因子SMAD2,SMAD3磷酸化水平;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL6和IL8表达。结果1.TGF-β1可诱导HBSMC增殖、细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I及α-SMA表达和炎症因子IL6,IL8的表达增加:相比TGF-β1未处理组,TGF-β1不同浓度不同时间点处理组HBSMC增殖增加,细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I及α-SMA m RNA和蛋白表达明显增加,炎症因子IL6和IL8蛋白表达增加,差异有统计学意义（P<0.05）。2.SMAD2/3-si RNA可抑制TGF-β1诱导细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I及α-SMA表达:相比NC-si RNA+TGF-β1组,SMAD2-si RNA+TGF-β1组和SMAD3-si RNA+TGF-β1组HBSMC细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I及α-SMA m RNA和蛋白表达明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。3.ALK5抑制剂和ERK1/2、P38、Akt通路抑制剂可抑制TGF-β1诱导HBSMC细胞外基质蛋白TNC、FN、Collagen I和α-SMA表达:对于TNC而言,相比TGF-β1处理组,ALK5抑制剂和ERK1/2、P38、Akt通路抑制剂预处理后TGF-β1处理组TNC m RNA和蛋白表达均显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）;对于FN、Collagen I和α-SMA言:ALK5抑制剂和P38、Akt通路抑制剂预处理后TGF-β1处理组TNC m RNA和蛋白表达均显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）;4.TNC-si RNA可抑制TGF-β1诱导HBSMC增殖,细胞外基质蛋白FN表达和炎症因子IL6、IL8分泌:与NC-si RNA+TGF-β1组相比,TNC-si RNA+TGF-β1组HBSMC增殖,细胞外基质蛋白FN m RNA和蛋白表达以及炎症因子IL6、IL8表达均降低,且差异有统计学意义（P<0.05）。5.TNC-si RNA可减弱TGF-β转录因子SMAD2/3磷酸化:与NC-si RNA相比,TNC-si RNA可以抑制TGF-β1不同时间点（15min,30min,1h）诱导HBSMC细胞SMAD2/SMAD3分子的磷酸化水平,差异有统计学意义（P<0.05）。小结TGF-β1可通过其经典ALK5/SMAD依赖通路和非经典的SMAD3不依赖通路诱导HBSMC增殖,分化和分泌细胞外基质及炎症因子IL6和IL8。TNC可通过调控SMAD2/3磷酸化水平参与TGF-β1诱导HBSMC增殖,细胞外基质蛋白FN表达以及炎症因子IL6和IL8的分泌。【全文结论】1.生物燃料烟雾慢性暴露可引起大鼠肺气肿和气道重塑,伴随肺部炎症和全身系统系炎症反应,以及肺部细胞外基质蛋白异常沉积。2.TNC和TGF-β1在生物燃料烟雾暴露大鼠肺中高表达。3.TGF-β1可通过其经典和非经典通路诱导HBSMC增殖、分化和细胞外基质蛋白表达及炎症因子表达。4.TNC通过作用SMAD2/SMAD3磷酸化参与TGF-β1诱导HBSMC增殖,FN表达和炎症因子IL6、IL8分泌。5.BRPM2.5可间接通过TGF-β通路和MAPK、Akt通路促进HBSMC炎症因子IL6和IL8分泌。
吴秋丽[9]（2019）在《低强度脉冲超声介导iPS-NSCs修复脊髓损伤的研究》文中进行了进一步梳理【目的】脊髓损伤（Spinal Cord Injury,SCI）是一种严重的创伤性疾病,修复手段主要有手术治疗、药物治疗、细胞移植等。神经干细胞移植能够有效促进SCI后神经功能的恢复,是当前研究的热点。iPSCs诱导的神经干细胞（induced Pluripotent Stem Cells-Neural Stem Cells,iPS-NSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,自体取材避免了伦理学争议和免疫排斥,应用于细胞移植治疗脊髓损伤具有显着的优势。然而干细胞在体内存活率低、向神经方向分化较难,因此如何更好的促进其增殖、定向分化是众多研究者关注的焦点。国内外研究表明低强度脉冲超声（Low Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS）是一种可以促进多种细胞增殖、分化的物理刺激手段,本研究旨在明确LIPUS对iPS-NSCs细胞特性的影响以及LIPUS介导的iPS-NSCs对脊髓损伤的修复作用,为干细胞的优化和SCI的治疗提供一种新的策略。本研究通过:1)体外培养iPS-NSCs,将自主研制的LIPUS激励系统作用于iPS-NSCs细胞,观察细胞的形态学、增殖、分化和神经营养因子（Neurotrophic Factors,NTFs）分泌含量的改变,明确LIPUS最佳的刺激参数,并初步探索LIPUS干预后细胞增殖的调控机制;2)建立脊髓损伤的动物模型,于脊髓损伤局部移植iPS-NSCs和LIPUS-iPS-NSCs细胞,评价细胞移植后SCI大鼠损伤局部组织学形态、神经营养因子含量以及运动功能的改变,初步探讨LIPUS介导iPS-NSCs细胞移植修复脊髓损伤的效果。【方法】本实验研究分为体外实验和体内实验两部分:体外实验:利用自主搭建LIPUS细胞激励系统,以不同的刺激参数干预iPS-NSCs细胞,观察细胞的形态,采用CCK-8检测其增殖活性的改变,明确LIPUS最佳的刺激参数;借助最佳的激励参数,通过TUNEL、ELISA、Western Blot以及免疫组化等方法,观察LIPUS对iPS-NSCs细胞凋亡、分化以及NTFs分泌的影响,并初步探讨细胞增殖与Notch信号通路的潜在关系。体内实验:采用Impactor model-Ⅲ打击器建立Wistar大鼠脊髓损伤动物模型,分为假手术组、单纯损伤组、iPS-NSCs移植组和LIPUS-iPS-NSCs移植组,在大鼠脊髓损伤后7天进行细胞移植。术前1天、术后1天至8周,采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能恢复情况;术后8周大鼠进行灌注取材切片,采用HE染色观察损伤局部空洞的面积,免疫荧光染色观察神经再生和胶质瘢痕形成的情况,ELISA检测局部脊髓组织中营养因子的含量。数据由统计学软件SPSS20.0进行分析,结果以均数±标准差（Mean±SD）形式表示,p<0.05表示具有统计学意义。【结果】1.本实验成功搭建了LIPUS细胞激励系统,LIPUS体外刺激iPS-NSCs细胞可以提高其增殖活性,且最佳的刺激参数为1MHz、8V（69.3 mW/cm2）;2.在最佳刺激参数下,LIPUS可以提高iPS-NSCs细胞活性,而对细胞凋亡没有产生明显的影响,因此1MHz、8V（69.3 mW/cm2）的LIPUS是一种安全、无创的物理刺激因子,同时能够促进iPS-NSCs细胞向神经元方向分化,促进上清液中BDNF、NGF的表达;3.在最佳刺激参数下,LIPUS干预可以促进iPS-NSCs细胞中受体Notch1和靶基因HES1蛋白水平的表达;4.在脊髓损伤体内实验中,细胞移植后,尤其是LIPUS-iPS-NSCs移植组,脊髓组织的空洞减小,轴突增生活跃,反应性星形胶质细胞减少,脊髓组织局部BDNF、NGF表达水平提高;5.功能学评分结果显示LIPUS-iPS-NSCs移植组大鼠的后肢运动功能恢复明显优于其他损伤组,差异具有统计学意义。【结论】1.本研究中自主搭建的LIPUS激励系统可以明显提高体外培养的iPS-NSCs细胞的增殖活性,增加细胞中神经营养因子的表达,促进其向神经元方向分化,其中Notch信号通路可能是调控LIPUS促进iPS-NSCs细胞活性的潜在机制;2.移植LIPUS优化的iPS-NSCs种子细胞,可以明显的改善脊髓损伤大鼠的后肢运动功能,减少局部胶质瘢痕的形成,促进轴突的再生和NTFs表达。本研究证明LIPUS是一种安全、无创的体外激励方法,可以提高iPS-NSCs细胞在脊髓损伤修复中的作用,为优化细胞移植的种子细胞提供了新策略,为脊髓损伤修复提供新思路。
何波[10]（2019）在《肾上腺素通过肺C-fibers介导大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的机制研究》文中研究说明第一部分改良低胸段急性脊髓损伤模型建立及继发肺损伤的研究目的:急性脊髓损伤（Acute spinal cord injury,ASCI）是临床常见的外科急症、危重症,严重影响患者生活质量及威胁患者生命安全,临床上ASCI患者最常见的并发症是呼吸系统疾病。目前对ASCI后呼吸系统并发症发生原因尚不明确且存在较大争议。为明确ASCI后是否会普遍存在继发肺部损伤,我们拟通过改良Allen’s打击法建立低胸段大鼠ASCI模型,探讨大鼠低胸段ASCI后是否出现继发肺损伤。方法:将大鼠随机分成假手术组、脊髓损伤组,每组根据6h、12h、1d、3d、1w、2w、4w不同时相点分为7个亚组;脊髓损伤组采用改良Allen’s打击法建立模型,脊髓损伤部位为低胸段T10水平,而假手术组仅切开椎板,暴露脊髓。分别于不同时相点处死大鼠取材:大体解剖标本观察肺部变化、HE染色（hematoxylin-eosin staining,HE）检测大鼠肺部病理变化、肺组织湿重/干重（wet/dry,W/D）评估肺水肿情况。结果:脊髓损伤组在损伤后12h出现肺肉眼出血和水肿,3天最为严重、1周开始缓解、4周基本恢复正常;假手术组中无一例肺组织出血及水肿;HE染色:脊髓损伤组于损伤后6小时出现散在肺泡毛细血管充血,12小时肺泡毛细血管有少量出血,3天肺出血、水肿达到高峰,1周开始缓解;损伤后24小时,脊髓损伤组肺W/D明显较假手术组高,且损伤后3天时水肿最为显着。结论:大鼠急性脊髓损伤后会继发肺组织充血、出血、水肿等病理改变,这可能是早期呼吸功能衰竭和肺部感染的病理基础。第二部分肾上腺素参与大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的机制研究目的:第一部分我们成功建立大鼠ASCI模型,并证实大鼠ASCI后会继发肺损伤。肾上腺素是肾上腺髓质分泌的主要激素,是产生应激反应的重要激素。研究表明其可影响肺部C类纤维的活性,导致肺部病理改变,其还可协同其他刺激物对离子通道的活性产生影响,所以我们推测肾上腺素可能参与大鼠ASCI后继发肺损伤的病理过程。在上述研究基础上本实验主要探讨大鼠ASCI后继发肺损伤可能的机制,明确肾上腺素是否参与大鼠ASCI后继发肺损伤。方法:检测大鼠ASCI后体内肾上腺素及去甲肾上腺素的水平,明确ASCI后两种激素的变化情况,找出可能参与病理过程的激素;将大鼠分为假手术组、切除双侧肾上腺组、切除双侧肾上腺ASCI组,建立大鼠切除双侧肾上腺后的ASCI模型。阻断大鼠肾上腺素后,HE染色观察切除肾上腺后大鼠ASCI后肺组织的病理变化情况,W/D评估大鼠肺水肿情况;同时检测大鼠肺组织中TRPVI（Transient receptor potential vanilloid receptor 1）及P物质（Substance P,SP）的表达情况,明确其介导肺部损伤的直接原因。结果:大鼠ASCI后血清肾上腺素水平明显增高,而去甲肾上腺素水平变化不明显;大鼠ASCI后肺组织内TRPV1及SP表达水平较假手术组明显增高,切除双侧肾上腺后ASCI,大鼠肺组织内TRPV1及SP表达水平较单纯ASCI组明显下降;切除双侧肾上腺后ASCI组大鼠肺组织出血、水肿等病理改变也较单纯脊髓损伤组明显减轻。结论:肾上腺素在大鼠急性脊髓损伤继发肺损伤中起到关键作用;其机制是激活肺组织中下游TRPV1离子通道,促进SP释放引起后续炎性反应导致继发肺损伤。第三部分PCFs在大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的作用及机制目的:肺C类纤维（Pulmonary C fibers,PCFs）是呼吸道的主要传入感觉神经,在刺激物或内源性炎性介质刺激下容易激活其表面的离子通道,导致PCFs被激活,激活的PCFs可释放大量的炎性介质及神经肽SP等,PCFs在呼吸系统疾病及肺部急性损伤中有发挥着重要作用。前部分实验我们发现导致大鼠ASCI后继发肺损伤的直接因素是释放大量的SP等因子,由于肺部SP的主要来源是激活的PCFs,所以我们推测PCFs也参与了继发肺损伤的病理过程,其可能正是肾上腺素的下游通道。本实验主要明确PCFs是否参与大鼠ASCI后继发肺损伤的病理过程,初步探讨其可能的机制及信号通路。方法:将成年大鼠分为三组:假手术组、空白对照组、大剂量辣椒素预处理后ASCI组。辣椒素处理组给予大剂量辣椒素处理,力求完全抑制PCFs,空白对照组给予同样不含辣椒素的混合液处理。检测各组ASCI后肺部出血、水肿等病理变化情况;检测肺组织中SP的表达变化情况。结果:辣椒素预处理组ASCI后大鼠肺组织出血、水肿等病理改变较空白对照组明显减轻,但仍比假手术组有明显升高;其大鼠肺组织内的SP表达也较空白对照组下降,但是仍高于假手术组。结论:PCFs参与大鼠ASCI后继发肺损伤的病理过程,并在介导肺损伤中其主要作用;大鼠ASCI后继发肺损伤是一个多因素、多通路、复杂的病理过程。
二、+G_z暴露后大鼠相关血管活性物质的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、+G_z暴露后大鼠相关血管活性物质的变化（论文提纲范文）
（1）基于酸敏感离子通道研究针刺预防性治疗偏头痛CSD模型鼠的机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 实验流程图 |
| 研究一 针刺预处理对CSD模型大鼠皮层ASIC1及三叉神经脊束核ASIC3的表达的影响 |
| 1 动物偏头痛模型制备 |
| 2 实验步骤 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 研究二 针刺预处理对CSD模型鼠降钙素基因相关(CGRP)在三叉神经脊束核的表达的影响 |
| 1 动物偏头痛模型制备 |
| 2 实验步骤 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 研究三 针刺预处理对CSD模型鼠血清中5-HT、CGRP含量的影响 |
| 1 动物偏头痛模型制备 |
| 2 实验步骤 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 1 中医学对偏头痛的认识及预防性治疗 |
| 2 偏头痛的的危害及现代医学对偏头痛的预防性治疗 |
| 3 偏头痛模型的假说和模型的选择 |
| 4 酸敏感离子通道ASIC1和ASIC3 |
| 5 CGRP在三叉神经节、三叉神经脊束核以及血液中的含量 |
| 6 血中5-HT含量 |
| 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 酸敏感离子通道在偏头痛作用中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）针刺预防性治疗对CSD模型大鼠脑皮质线粒体呼吸链功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 针刺预处理对CSD模型大鼠额叶皮层线粒体形态与结构的改善情况 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 第二部分 针刺预处理对CSD模型大鼠皮层线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ活性的改善情况 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 第三部分 针刺预处理对CSD模型大鼠皮层及三叉神经脊束核C-fos表达及血清中NO含量的改善情况 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 讨论 |
| 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 基于线粒体能量代谢的偏头痛发病机制的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 综述一 心肌梗死合并焦虑与CXC趋化因子的相关性研究 |
| 1 心肌梗死合并焦虑流行病学 |
| 2 CXC趋化因子在心肌梗死中的表达及作用 |
| 2.1 趋化因子结构、表达及作用 |
| 2.2 趋化因子受体结构、表达及作用 |
| 2.3 CXC趋化因子在心肌梗死中的表达及作用 |
| 3 CXCL12/CXCR4生物轴介导心肌梗死后炎症 |
| 3.1 CXCL12结构、表达及作用 |
| 3.2 CXCR4结构、表达及作用 |
| 3.3 CXCL12/CXCR4在心肌梗死中的表达及作用 |
| 4 炎症机制与心肌梗死合并焦虑疾病 |
| 5 心肌梗死合并焦虑的临床治疗 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 柴胡加龙骨牡蛎汤古方今用及药理机制研究 |
| 1 柴胡加龙骨牡蛎汤方证分析 |
| 2 柴胡加龙骨牡蛎汤近现代应用 |
| 3 柴胡加龙骨牡蛎汤单药及复方现代药理研究 |
| 4 柴胡加龙骨牡蛎汤的效用机制研究 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 研究一 药物治疗对冠心病伴焦虑状态患者炎症因子影响的Meta分析 |
| 前言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 文献检索 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 诊断标准 |
| 1.5 资料提取 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 纳入研究质量评价及基本特征 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入文献研究质量评价 |
| 2.3 纳入研究的基本信息情况 |
| 3 Meta分析结果 |
| 3.1 外周血中Hs-CRP因子表达 |
| 3.2 外周血中IL-6因子表达 |
| 3.3 外周血中IL-8因子表达 |
| 3.4 外周血中IL-17因子表达 |
| 3.5 外周血中TNF-α因子表达 |
| 3.6 纳入研究中不同组别HAMA量表评分情况 |
| 3.7 纳入研究中不同组别HAMD量表评分情况 |
| 3.8 纳入研究中不同组别SDS量表评分情况 |
| 3.9 各项研究发表偏倚风险评价情况 |
| 3.10 各项研究不良反应发生情况 |
| 4 纳入研究证据质量评价 |
| 5 结论 |
| 5.1 主要研究结论 |
| 5.2 本研究的不足 |
| 5.3 研究的临床意义及展望 |
| 参考文献 |
| 研究二 柴胡加龙骨牡蛎汤调控CXCR4/NF-KB/GSDMD炎症通路抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究 |
| 实验一: 慢性不可预知性空瓶刺激对心肌梗死大鼠CXCL12/CXCR4生物轴的影响 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 心肌梗死大鼠心电图出现异常Q波 |
| 3.2 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠产生焦虑样行为改变 |
| 3.3 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠骨髓中CXCL12的含量下降 |
| 3.4 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠CXCR4表达亢进 |
| 3.5 CXCL12/CXCR4生物轴失衡加重炎症反应 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二: 柴胡加龙骨牡蛎汤调控CXCR4/NF-κB/GSDMD炎症通路抑制心肌梗死合并焦虑炎症机制 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 给药方式及分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症反应 |
| 3.2 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制纤维化,改善心脏功能 |
| 3.3 柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌细胞的损伤 |
| 3.4 柴胡加龙骨牡蛎汤降低外周血中IL-1β、IL-18的表达水平 |
| 3.5 柴胡加龙骨牡蛎汤调节海马区5-HT、DA合成,缓解焦虑 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三: 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠皮层及海马炎症部分机制 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 给药方式及分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制海马区炎症蛋白表达 |
| 3.2 柴胡加龙骨牡蛎汤降低皮层区炎症蛋白表达水平 |
| 3.3 柴胡加龙骨牡蛎汤改善海马区神经损伤 |
| 3.4 柴胡加龙骨牡蛎汤缓解心肌梗死合并焦虑大鼠焦虑样行为 |
| 3.5 柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死合并焦虑大鼠心脏功能 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 在读期间研究成果 |
（4）环境浓度NP长期暴露对雄性大鼠甲状腺功能与增生性病变的影响及锌硒茶干预研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 环境浓度NP长期暴露对雄性大鼠甲状腺功能及增生性病变的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 本次研究的不足之处 |
| 第二部分 锌硒茶干预NP长期暴露对大鼠甲状腺功能的保护作用 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 本次研究的不足之处 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）有机阴离子转运体（Oats）和糜酶/AngⅡ在阿德福韦所致慢性肾损伤和甲氨蝶呤所致急性肾损伤中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 药源性肾损伤 |
| 1.2 肾脏转运体在药源性肾损伤中的作用 |
| 1.2.1 肾脏中的摄取型转运体 |
| 1.2.2 肾脏中的外排型转运体 |
| 1.2.3 肾脏转运体对药源性肾损伤的影响 |
| 1.3 糜酶/AngⅡ在肾损伤中的作用 |
| 1.3.1 肾脏AngⅡ的生成 |
| 1.3.2 AngⅡ对肾脏微血管的影响 |
| 1.4 立题依据 |
| 第二章 Oats和糜酶/AngⅡ在阿德福韦所致慢性肾损伤中的作用.. |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验仪器与材料 |
| 2.2.1 实验仪器 |
| 2.2.2 药品和试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1动物实验 |
| 2.3.2细胞实验 |
| 2.3.3 阿德福韦浓度测定 |
| 2.3.4 肾损伤相关生化参数测定 |
| 2.3.5 组织学评价 |
| 2.3.6 蛋白表达定量分析 |
| 2.3.7 数据统计及处理分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 阿德福韦对大鼠肾间质中肥大细胞的影响 |
| 2.4.2 阿德福韦对RBL-2H3细胞糜酶释放的影响 |
| 2.4.3 阿德福韦对大鼠 AngⅡ浓度的影响tically 福韦组韦+tically 福韦组+ |
| 2.4.4 阿德福韦对肾脏微血管的影响 |
| 2.4.5 色甘酸钠和缬沙坦对大鼠肾间质中肥大细胞的影响 |
| 2.4.6 色甘酸钠和缬沙坦对大鼠AngⅡ浓度的影响 |
| 2.4.7 色甘酸钠和缬沙坦对肾脏微血管的影响 |
| 2.4.8 色甘酸钠和缬沙坦对阿德福韦所致肾损伤中生化指标的影响 |
| 2.4.9 色甘酸钠和缬沙坦对阿德福韦所致肾损伤中病理学改变的影响 |
| 2.4.10 色甘酸钠和缬沙坦对阿德福韦所致肾损伤中转运体的调节 |
| 2.4.11 色甘酸钠和缬沙坦对阿德福韦浓度的影响 |
| 2.5 讨论及小结 |
| 2.6 局限性 |
| 第三章 Oats和糜酶/AngⅡ在甲氨蝶呤所致急性肾损伤中的作用.. |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验仪器和试剂 |
| 3.2.1 实验仪器 |
| 3.2.2 药品与试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1动物实验 |
| 3.3.2细胞实验 |
| 3.3.3 甲氨蝶呤浓度测定 |
| 3.3.4 血样和尿样相关生化参数的测定 |
| 3.3.5 组织病理学评价 |
| 3.3.6 蛋白表达定量分析 |
| 3.3.7 数据统计及处理分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 甲氨蝶呤与吲哚美辛合用引起急性肾损伤 |
| 3.4.2 甲氨蝶呤与吲哚美辛合用对大鼠肾间质肥大细胞的影响 |
| 3.4.3 甲氨蝶呤对RBL-2H3细胞糜酶释放的影响 |
| 3.4.4 吲哚美辛对RBL-2H3细胞糜酶释放的影响 |
| 3.4.5 甲氨蝶呤与吲哚美辛合用对大鼠AngⅡ浓度的影响 |
| 3.4.6 甲氨蝶呤合用吲哚美辛对大鼠肾脏相关转运体表达的影响 |
| 3.4.7 色甘酸钠对甲氨蝶呤肾损伤的影响 |
| 3.5 讨论及小结 |
| 3.6 不足与展望 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（6）血管重构在门脉高压症中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 绪论 |
| 第一部分:门静脉高压症与动脉重构 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验材料、试剂和实验仪器 |
| 1.1.2 实验动物 |
| 1.1.3 实验方法 |
| 1.1.4 实验数据统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 肝硬化PHT组大鼠造模 |
| 1.2.2 非肝硬化PHT组大鼠造模 |
| 1.2.3 肝硬化PHT组大鼠存在肠系膜动脉重构表型 |
| 1.2.4 非肝硬化PHT组大鼠无肠系膜动脉重构表型 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二部分:门静脉高压症动脉重构的结构表现 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料、试剂和实验仪器 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.1.4 实验数据统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 磷酸化 e NOS在肝硬化 PHT大鼠肠系膜动脉中表达增多 |
| 2.2.2 电镜检测大鼠肠系膜动脉结构异常 |
| 2.2.3 钙调蛋白在肝硬化PHT大鼠肠系膜动脉中表达减少 |
| 2.2.4 弹性蛋白在肝硬化PHT大鼠肠系膜动脉中表达减少 |
| 2.2.5 平滑肌肌动蛋白在肝硬化PHT大鼠肠系膜动脉中表达减少 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三部分:VEGFR-3 与门静脉高压症动脉重构 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料、试剂和实验仪器 |
| 3.1.2 实验动物 |
| 3.1.3 实验方法 |
| 3.1.4 实验数据统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 肝硬化PHT组大鼠SMA上 VEGFR-3 表达增多 |
| 3.2.2 肝硬化PHT组大鼠SMA上增殖信号表达增多 |
| 3.2.3 肝硬化PHT组大鼠SMA上凋亡信号表达增多 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四部分:抑制VEGFR-3 与门静脉高压症动脉重构 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料、试剂和实验仪器 |
| 4.1.2 实验动物 |
| 4.1.3 实验方法 |
| 4.1.4 实验数据统计学分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 MAZ-51 对肝硬化PHT大鼠血流动力学无明显改变 |
| 4.2.2 MAZ-51 改善肝硬化PHT大鼠SMA重构 |
| 4.2.3 MAZ-51 对肠系膜动脉VEGFR-3 表达无明显改变 |
| 4.2.4 MAZ-51 抑制SMA平滑肌细胞凋亡 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五部分:VEGFR-3 信号通路与门静脉高压症动脉重构 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料、试剂和实验仪器 |
| 5.1.2 实验动物 |
| 5.1.3 实验方法 |
| 5.1.4 实验数据统计学分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 时间梯度VEGF-D刺激肠系膜动脉EC下游磷酸化表达增加 |
| 5.2.2 浓度梯度VEGF-D刺激肠系膜动脉EC下游磷酸化表达增加 |
| 5.2.3 运用VEGFR-3 抑制剂MAZ-51 刺激肠系膜动脉EC下游磷酸化表达减少 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 学术论文和科研成果目录 |
（7）腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 实验材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述:腺苷预处理治疗脑缺血再灌注损伤炎症因素相关研究综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）基质蛋白Tenascin-C介导TGF-β在生物燃料烟雾致大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中英文词汇对照表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分:TNC和TGF-β1在生物燃料烟雾致大鼠慢阻肺中表达增加 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分:生物燃料PM2.5对人支气管平滑肌细胞炎症的影响及机制 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分:TNC参与TGF-β1诱导气道平滑肌慢阻肺样病理改变 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 细胞外基质紊乱和慢阻肺研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（9）低强度脉冲超声介导iPS-NSCs修复脊髓损伤的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、LIPUS激励iPS-NSCs最佳物理参数的研究 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验器械 |
| 1.1.2 实验试剂 |
| 1.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建 |
| 1.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定 |
| 1.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立 |
| 1.1.6 CCK-8 检测iPS-NSCs增殖活性 |
| 1.1.7 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 成功搭建低强度脉冲超声激励系统 |
| 1.2.2 iPS-NSCs细胞的形态学观察及细胞鉴定 |
| 1.2.3 LIPUS对 iPS-NSCs增殖活性的影响以及最佳激励条件的确定 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 LIPUS在生物组织中的理学效应及其在骨科学中的应用 |
| 1.3.2 神经干细胞在神经系统中的起源、特点和作用 |
| 1.3.3 诱导神经干细胞的来源及诱导体系 |
| 1.3.4 LIPUS对细胞增殖的作用 |
| 1.4 小结 |
| 二、在最佳生物学参数下,LIPUS优化iPS-NSCs细胞特性的研究 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验器械 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建 |
| 2.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定 |
| 2.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立 |
| 2.1.6 TUNEL检测iPS-NSCs细胞凋亡的情况 |
| 2.1.7 ELISA检测iPS-NSCs细胞上清液中神经营养因子的含量 |
| 2.1.8 Western Blot检测Notch信号通路及细胞分化情况 |
| 2.1.9 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞凋亡率的变化 |
| 2.2.2 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞中NTFs含量的变化 |
| 2.2.3 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞分化的情况 |
| 2.2.4 LIPUS激励iPS-NSCs后 Notch信号通路相关蛋白含量的变化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 LIPUS对 iPS-NSCs细胞生物特性的影响 |
| 2.3.2 LIPUS激励iPS-NSCs可能的作用机制 |
| 2.3.3 LIPUS修复神经损伤的潜力 |
| 2.4 小结 |
| 三、LIPUS介导iPS-NSCs细胞移植修复脊髓损伤的研究 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验器械 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 脊髓损伤动物模型建立 |
| 3.1.4 细胞移植 |
| 3.1.5 BBB运动功能评分 |
| 3.1.6 脊髓标本取出及制作切片 |
| 3.1.7 石蜡切片的制备 |
| 3.1.8 HE染色 |
| 3.1.9 免疫荧光观察移植细胞在体内分化情况 |
| 3.1.10 ELISA检测测定脊髓组织内的营养因子的表达情况 |
| 3.1.11 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 HE染色结果 |
| 3.2.2 GFAP、NF200 免疫荧光染色结果 |
| 3.2.3 脊髓组织内的营养因子的表达情况 |
| 3.2.4 BBB评分结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 脊髓损伤动物模型的制备及运动功能评价指标的选择 |
| 3.3.2 NSCs在脊髓损伤修复中的作用及应用 |
| 3.3.3 多潜能干细胞在神经损伤等再生医学方面的应用 |
| 3.3.4 LIPUS介导的iPSc-NSCs修复脊髓损伤可能的作用机制 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 综述 低强度脉冲超声在神经修复中的应用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）肾上腺素通过肺C-fibers介导大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 改良胸段急性脊髓损伤模型建立及继发肺损伤的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肾上腺素参与大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 PCFs在大鼠急性脊髓损伤中的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间的研究成果及发表的学术论文 |
四、+G_z暴露后大鼠相关血管活性物质的变化（论文参考文献）
- [1]基于酸敏感离子通道研究针刺预防性治疗偏头痛CSD模型鼠的机制[D]. 安雪晶. 天津中医药大学, 2021(01)
- [2]针刺预防性治疗对CSD模型大鼠脑皮质线粒体呼吸链功能的影响[D]. 白晓平. 天津中医药大学, 2021(01)
- [3]从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究[D]. 侯季秋. 北京中医药大学, 2021(01)
- [4]环境浓度NP长期暴露对雄性大鼠甲状腺功能与增生性病变的影响及锌硒茶干预研究[D]. 王林. 遵义医科大学, 2020
- [5]有机阴离子转运体（Oats）和糜酶/AngⅡ在阿德福韦所致慢性肾损伤和甲氨蝶呤所致急性肾损伤中的作用[D]. 魏萌萌. 兰州大学, 2020(01)
- [6]血管重构在门脉高压症中的作用机制研究[D]. 郑磊. 上海交通大学, 2020
- [7]腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB表达的影响[D]. 阴雪妍. 新乡医学院, 2020(12)
- [8]基质蛋白Tenascin-C介导TGF-β在生物燃料烟雾致大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用及机制研究[D]. 郝斌威. 广州医科大学, 2019(02)
- [9]低强度脉冲超声介导iPS-NSCs修复脊髓损伤的研究[D]. 吴秋丽. 天津医科大学, 2019(02)
- [10]肾上腺素通过肺C-fibers介导大鼠急性脊髓损伤后继发肺损伤的机制研究[D]. 何波. 重庆医科大学, 2019(01)