一、盐酸埃他卡林对正常大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响（论文文献综述）
王苏阳[1]（2016）在《埃他卡林对体循环、脑循环、肺循环微动脉内皮细胞SUR2B/Kir6.1通道的激活作用及能量代谢物质的调节作用》文中研究表明在高血压病的情况下,全身的血管持续承受过高灌注压,容易造成整个循环系统的病变,诱发诸多心血管疾病,对人类健康形造了极大的威胁。血液在小动脉和微动脉中流动时,其受到的阻力远大于主动脉和容量血管等直径较大的血管,所以人类的动脉总压力降当中的绝大部份存在于微循环中的微动脉和微静脉之间,因此微动脉是阻力血管的主要组成部分。高血压病的最基本的病理机制即是微小动脉的异常收缩,管壁对血液流动的阻碍作用增加,最终导致血压升高。但遗憾的是目前临床所使用的高血压药物当中,扩血管类药物普遍不具备阻力血管选择性,对大中血管的影响引起了一系列不良反应的发生。ATP敏感性钾通道（KATP）开放剂因其强大的扩血管作用被广泛研究并用于高血压的治疗。在不同组织中,KATP通道亚型的组成和分布不同,功能各异,是细胞膜上可以偶联细胞兴奋性和能量代谢的一类重要分子。其SUR 2B/Kir 6.1和SUR 2B/Kir 6.2是血管上存在的主要KATP亚型,SUR 2B/Kir 6.1在微小血管表达尤其丰富,选择性激活SUR 2B/Kir 6.1亚型的KATP可以达到扩张阻力血管而同时不影响主动脉和容量血管的目的,有效避免了其他KATP开放剂因为同时作用于多种亚型因而在相应的组织当中产生的毒副作用。埃他卡林是我室研发的具有自主知识产权的新型KATP通道开放剂。大量的前期工作已经证实埃他卡林降压作用显着,药效持续时间长而稳定,能够保护在高血压状态下极易受损的重要器官或组织,包括心、脑、肺、肾、心血管等,减轻胰岛素抵抗。埃他卡林的降血压作用具有高血压状态选择性,能够降低患有高血压病的动物和患者的血压,而不影响正常人和动物的血压。埃他卡林产生上述治疗作用的主要机制是基于强效的血管内皮保护作用。近期结果显示,埃他卡林能够选择性舒张高血压状态下的阻力血管而对大血管无明显影响,这种调控作用可被格列本脲（KATP特异性阻断剂）所拮抗,在去处内皮组织的微动脉环上,埃他卡林的舒张作用大幅减弱,只有完整微动脉环的30%左右。这一结果进一步提示了埃他卡林发挥的靶向阻力血管的降压作用主要是由内皮细胞上的KATP所介导。而异源表达不同亚型KATP通道的实验结果证实,埃他卡林能够高选择性的开放SUR 2B/Kir 6.1亚型的KATP通道。因此,本文第一部分采用电生理学结合细胞内微灌流的方法,就埃他卡林对于构成阻力血管的两种细胞,即平滑肌细胞和内皮细胞上KATP的开放作用特点以及确切的分子靶标进行深入研究。我们发现在急性分离的大鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞上给予埃他卡林10-8、10-7、10-6、10-5、10-4和10-3mol/L时,给药后全细胞电流的幅度分别为给药前的（96.91±3.05）%、（111.89±1.93）%、（127.07±8.6）%、（148.27±6.87）%、（195.48±12.32）%和（190.12±19.42）%（n=6）,在给予格列本脲10-6mol/L后,电流幅度降低至（89.76±2.63）%（n=6）。在Kir 6.1基因敲除小鼠模型上,埃他卡林能够激活野生型（WT）小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞KATP:给予埃他卡林10-6、10-5、10-4mol/L,全细胞电流分别增加至（119.25±4.08）%、（134.04±1.92）%和（180.98±14.86）%（n=6）,该电流可被格列本脲拮抗至（89.72±5.51）%（n=6）。在杂合子（Kir 6.1+/-）小鼠的实验中,埃他卡林的激活作用仍然存在:给予埃他卡林10-6、10-5、10-4mol/L,电流幅度显着增大,分别是给药前的（126.62±8.84）%、（149.44±5.88）%和（205.42±24.22）%（n=6）,给予格列本脲后电流幅度减小为（94.06±2.22）%（n=6）。埃他卡林高剂量（10-4mol/L）在纯合子（Kir 6.1-/-）小鼠上并未引起全细胞电流幅度的改变。结果表明埃他卡林对阻力血管的作用确实是由激活SUR 2B/Kir 6.1亚型的KATP通道所介导。在大鼠肠系膜微动脉内皮细胞上,埃他卡林和吡那地尔激活KATP的作用均依赖于胞内能量物质ATP、ADP、UDP的存在。埃他卡林在胞内ATP、ADP、UDP浓度为1001000μM时才产生显着的激活作用,而吡那地尔在内灌ATP浓度在105000μM,ADP、UDP浓度为103000μM的情况下,均可产生激活作用,提示埃他卡林对于细胞所处的能量状态具有选择性。镁离子对埃他卡林和吡那地尔激活大鼠肠系膜微动脉内皮细胞KATP的作用都是必要的。对埃他卡林而言,不水解的ATP衍生物ATPγs不能替代ATP支持其开放KATP通道的功能,而ATPγs存在时,吡那地尔的开放作用较ATP存在时显着增强。这表示吡那地尔的激活作用是基于ATP的配体作用,埃他卡林开放肠系膜微动脉内皮细胞KATP通道则依赖ATP的水解。以缺血、缺氧损伤为病理基础发生发展形成的各种血管疾病是非常严重的健康和社会问题,可导致重要器官产生不可逆损伤,甚至死亡。脑卒中是脑血液的供给减少或中断直接导致脑缺氧缺血从而引起的神经功能障碍和脑血管疾病。在缺血缺氧性脑损伤过程中,脑微循环内皮细胞损伤直接导致血脑屏障功能遭受破坏,引起血管病变及脑水肿,进而引发神经元受损。慢性低氧性肺动脉高压的主要病理特点是肺血管痉挛和肺血管重构。低氧条件下的肺微小动脉剧烈收缩,其内皮细胞损伤是诱发肺动脉压升高的重要原因。因此,研究针对改善微小血管内皮功能的药物对治疗肺动脉高压意义十分重大。近些年来,我们的研究成果表明埃他卡林在脑缺血、缺氧模型上有显着的神经保护作用,其治疗作用机制与KATP高度相关。在内皮素-1诱导的或者低氧所致的肺动脉高压模型上,埃他卡林对肺微动脉具有明显的剂量依赖性的扩张作用,同时可以逆转肺小动脉重构,改善肺微动脉内皮功能。脑、肺微动脉内皮细胞上均有KATP表达,该通道的开放受细胞内ATP/ADP调控,在多种组织和细胞中具有抗缺血/缺氧损伤的内源性保护作用。第一部分的实验结果证实埃他卡林能够直接激活体循环阻力血管内皮细胞上SUR 2B/Kir 6.1亚型的KATP,其激活作用与细胞能量代谢状态相关,于是本文的第二、三部分就埃他卡林能否在脑循环、肺循环的微动脉内皮细胞上实现其保护作用,为能量代谢异常导致的血管疾病提供一种可能的治疗途径进行初步探索。我们采用与肠系膜微动脉内皮细胞上相同的实验方法发现:埃他卡林在ATP、ADP、UDP浓度为1000μM时可显着的激活脑微动脉内皮细胞KATP。在肺微动脉内皮细胞上,在ATP浓度为1001000μM、ADP浓度为301000μM、UDP浓度为1001000μM时,埃他卡林可产生激活作用。在胞内无镁离子存在以及内灌ATPγs两种实验情况下,埃他卡林不激活脑、肺微动脉内皮细胞上的KATP。综上所述,本文结论如下:1埃他卡林可以浓度依赖性的开放阻力血管平滑肌细胞KATP通道,起效浓度为10-7 mol/L,在10-4 mol/L时作用最强,并且是选择性作用于KATP通道SUR2B/Kir 6.1亚型的。2埃他卡林能够开放大鼠肠系膜、脑、肺微动脉内皮细胞的KATP通道,开放作用均依赖于胞内能量物质ATP、ADP、UDP、Mg2+的存在且具有显着的细胞能量状态选择性,与ATP的水解作用相关。3作用于脑微动脉内皮细胞KATP时,埃他卡林的激活作用最强,且药物起效所需的能量物质浓度范围明显窄于其它两种内皮细胞,仅在ATP、ADP或者UDP浓度为1000μM时才产生显着的激活作用,在能量物质处于其他浓度时均不进一步激活细胞的KATP,提示药物的脑保护作用与能量代谢有极高的相关性。
黄景慧[2]（2013）在《埃他卡林选择性抗高血压作用分子机制的研究》文中研究说明高血压是严重危害人类健康的常见病和多发病，全球有超过10亿高血压病人需要终身服药[1]，目前已成为心脑血管疾病发病的首要危险因素，防治形势十分严峻[2、3]。就病因而言，高血压主要是由于血管总外周阻力增加所致[4]。阻力血管由小动脉和微动脉构成，这两类血管过度收缩所致的压力增高是高血压发生和发展最基本的病理生理机制[5]。因此，高选择性调控阻力血管是治疗高血压的根本[6]。遗憾的是，在将近300种高血压药物中，尚没有一种药物对阻力小动脉和微动脉有高选择性扩张作用。血管扩张剂作为一类重要的抗高血压药物，如钙拮抗剂等，广泛应用于高血压治疗，然而在扩张阻力血管的同时不可避免地扩张大动脉和容量血管，引起心跳加快、水钠潴留等不良反应[7]。因此，研究选择性扩张阻力血管的药物具有重要的价值。ATP敏感性钾通道（ATP-sensitive potassium channel, KATP）是调节阻力血管张力重要的药物靶标之一。埃他卡林（Ipt）是一种新结构类型的KATP开放剂[8]。临床前的大量药理学研究表明埃他卡林降压作用平稳持久；能保护高血压所致的心、肾、脑等重要靶器官损伤[9]，逆转心血管重构[10]，改善高血压相关胰岛素抵抗[11]；逆转多种心血管危险因素所致的内皮细胞功能紊乱，具有强效内皮保护作用[12]，其分子机制与其纠正内皮细胞一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）系统功能的失衡和激活Chemerin/ChemR23系统有关[13]。近期研究结果表明，Ipt可以选择性开放SUR2B/Kir6.1亚型的KATP通道，而阻力血管SUR2B/Kir6.1亚型的KATP通道高表达[14、15]，可以推测Ipt可能对阻力血管张力具有选择性调控作用。因此，本论文研究目的为：研究Ipt对阻力血管的扩张特点；并以Ipt为工具药，研究其扩张血管作用分子机制。我们首先应用KCl致预收缩的大鼠肠系膜微动脉模型和高灌注压模拟阻力血管张力增高模型，研究发现Ipt对大鼠不同组织中阻力血管的扩张强度不同，顺序为：肠系膜微动脉＞软脑膜＞肺＞骨骼肌。因此选择肠系膜微动脉作为进一步研究对象。由于阻力血管管径越小，其对总外周阻力的贡献越大。而我们在80mmHg灌注压下发现，随着肠系膜动脉的管径越小，Ipt的扩张作用越强，说明Ipt对阻力血管扩张作用具有选择性。在肠系膜微动脉的正常生理灌注压（20mmHg）下，Ipt没有扩血管作用，随着压力增高，其扩张作用变强，这也与临床试验中Ipt常规治疗并不降低血压正常受试者的血压，而对高血压的病人则具有强效降压作用的结果一致。血管内皮功能障碍与高血压关系密切，目前尚没有靶向改善血管内皮功能、副作用低的抗高血压药物出现。如血管紧张素转化酶抑制剂（ACEIs）有效成分缓激肽（BK）及P物质（SP）虽通过内皮产生舒血管作用，但因其产生干咳等副作用限制临床应用。因此，研究改善血管内皮活性，副作用小的抗高血压药物具有重要意义。阻力血管由内皮细胞和平滑肌细胞两类细胞组成。在去内皮的微动脉环上，Ipt的扩血管作用大幅度降低，提示除了直接扩张平滑肌细胞外，Ipt对阻力血管的扩张作用具有明显的内皮依赖性。PGI2，NO和EDHF是目前报道的参与介导内皮依赖性扩血管作用三类重要的扩张因子。本研究首先证明，不同于临床对血管有扩张作用的抗高血压药物，如血管紧张素转移酶抑制剂（ACEIs）促进释放的缓激肽（BK）、P物质（SP），Ipt扩血管作用与PGI2无关，而与其促进EDRF即NO释放有关。在进一步NO通路研究中，我们发现Ipt介导的扩血管作用可被钙调素（CaM）抑制剂卡米达唑（CMZ）抑制，也可被可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）抑制剂ODQ抑制，提示Ipt激活内皮细胞KATP后通过Ca2+/CaM激活eNOS活性，促进NO释放，并通过NO-sGC-cGMP的分子途径介导平滑肌扩张；目前，H2O2、H2S、EETs和K+都被认为可能是EDHF。本研究发现K+作为唯一的EDHF介导了Ipt引起的EDHF-样扩血管作用，而与其他几种EDHFs无关，这完全不同于经典的乙酰胆碱（ACh）、BK及SP诱导的内皮依赖性舒血管反应。当EDRF抑制剂与EDHF抑制剂合用时，Ipt的扩血管作用与去内皮后的扩张作用相当，再次证明Ipt激活内皮细胞KATP后，主要影响NO释放和激活内皮表达的I/SKCa通道介导内皮依赖性扩血管作用。在血管组织中主要表达有Kir、Kv、BKCa和KATP四类钾通道，他们在调节血管张力中均起重要作用[16]。本研究中发现Kir通道、Kv通道及BKCa通道均不参与Ipt诱导的扩血管作用；而膜KATP通道特异性阻断剂Gli则可以显着拮抗Ipt的作用，提示Ipt扩血管作用与开放细胞膜KATP通道相关。在不同的组织上，KATP通道亚型的组成和分布并不相同且功能各异。通常认为胰腺β细胞KATP由SUR1/Kir6.2构成，参与了胰岛素分泌和血糖代谢的调节；心肌细胞膜KATP由SUR2A/Kir6.2构成，参与了心肌缺血预适应，改善心肌能量代谢等心脏保护机制；而血管组织（包括平滑肌和内皮细胞）KATP主要由SUR2B/Kir6.1构成，其特性较为复杂，不同部位血管对不同KATP通道开放剂的反应并不一致。目前临床上用于抗高血压的KATP开放剂，虽然具有降压作用，但因组织选择性差和KATP的亚型选择性不高，不可避免地产生诸多副作用。因此，我们认为靶向SUR2B/Kir6.1亚型KATP通道开放剂可以高选择性调控阻力血管张力，同时可避免临床KATP开放剂由于组织选择性差和KATP的亚型选择性不高引起的不良反应的发生。我们进一步在Kir6.1基因敲除小鼠模型发现Ipt扩血管作用完全消失；在直接去内皮以及药理学去内皮的情况下，Gli可以完全阻断Ipt直接扩张平滑肌的作用，以上结果表明Ipt是通过激活Kir6.1亚型KATP通道扩张阻力血管的。结合前期研究工作和目前的发现，我们提出了靶向SUR2B/Kir6.1亚型KATP通道开放剂Ipt阻力血管张力调控新的分子机制：30%扩血管作用来自Ipt直接激活平滑肌细胞KATP，导致细胞内K+外流，细胞膜超极化，阻断电压依赖性钙通道，降低细胞内游离钙离子浓度，引起血管平滑肌松弛，从而扩张血管。70%扩血管作用主要源于Ipt激活内皮细胞KATP，引起细胞膜超极化。由于内皮细胞内不表达电压依赖性钙通道，而表达受体操控的阳离子通道（ROCC），膜超极化可以导致ROCC开放，胞内游离钙离子浓度升高，并通过钙离子-钙调素增强eNOS的活性，增加EDRF（NO）的释放，通过NO-sGC-cGMP通路影响平滑肌内游离钙离子浓度，从而引起血管平滑肌松弛，EDRF对Ipt扩张阻力血管的贡献约为30%。另一方面，Ipt可促进内皮细胞释放唯一的EDHF即K+，进一步造成平滑肌细胞膜的超极化，关闭平滑肌电压依赖性钙通道，引起血管扩张，K+参与扩张阻力血管的贡献约为40%。除此之外，Ipt引起的内皮细胞膜超极化还可能通过内皮-平滑肌之间的缝隙连接即（myoendothelial gap junctions, MEGJ），将电信号传递到平滑肌细胞，介导血管扩张反应。平滑肌细胞膜超极化还会通过MEGJ进一步使内皮细胞膜超极化，它们之间形成正性循环。综上所述，内皮细胞EDHF（K+）、EDRF（NO）与平滑肌细胞KATP参与Ipt扩张阻力血管的贡献比例约为4:3:3，这不同于任何一个高血压治疗药物。
王慧[3]（2010）在《埃他卡林对长期低氧大鼠肺组织eNOSmRNA和蛋白表达的影响》文中研究指明目的:低氧性肺动脉高压（HPH）是慢性阻塞性肺病（COPD）发展为慢性肺源性心脏病的关键环节,基于新型ATP敏感性钾(KATP)通道开放剂埃他卡林（IPT）能预防和抑制HPH的形成,本实验目的在于探讨长期低氧对大鼠肺组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）mRNA和蛋白表达的影响,及IPT对长期低氧大鼠肺组织eNOS mRNA和蛋白表达的作用,从而进一步探讨IPT治疗HPH的分子生物学基础,以便为其发展为新型治疗HPH的药物提供理论基础。方法: SD雄性大鼠60只随机分成对照组(生理盐水5 ml·kg-1·d-1,ig)、低氧组(生理盐水5 ml·kg-1·d-1,ig)、IPT低剂量组(IPT 0.75 mg·kg-1·d-1,ig)、IPT高剂量组(IPT 1.5 mg·kg-1·d-1,ig),每组15只。将低氧组、IPT低剂量和IPT高剂量组大鼠放入常压低氧舱内[O2（10%±0.5%）],每周6天,每天8小时,4周后测定平均肺动脉压（mPAP）、右心指数（RV/（LV+S））、血浆一氧化氮（NO）浓度。提取肺组织总RNA和总蛋白,采用逆转录PCR（RT-PCR）技术,分析各组肺组织eNOS mRNA表达;采用Western-blot技术,分析各组肺组织eNOS蛋白表达。结果:（1）低氧组大鼠mPAP（32.12±3.77 mmHg）显着高于对照组（18.90±1.30 mmHg）（P <0.05）,IPT低剂量组和IPT高剂量组mPAP（21.64±2.29、20.17±2.19 mmHg）较低氧组显着下降（P <0.05）;（2）低氧组大鼠RV（/LV+S）（0.339±0.018）显着高于对照组（0.256±0.007）（P <0.05）,IPT低剂量组和IPT高剂量组RV/（LV+S）（0.285±0.013、0.274±0.011）较低氧组显着下降（P <0.05）;（3）低氧组大鼠血浆NO浓度(21.22±2.54μmol·L-1)显着低于对照组(31.84±7.41μmol·L-1)（P<0.05）,IPT低剂量和IPT高剂量组(31.18±4.54μmol·L-1、34.81±6.54μmol·L-1)较低氧组显着上升（P <0.05）;（4）大鼠肺组织存在eNOS mRNA表达。RT-PCR结果显示:低氧组eNOS mRNA表达量的灰度比值（0.063±0.005）显着低于对照组（0.295±0.025）（P<0.05）;IPT低剂量和IPT高剂量组eNOS mRNA表达量的灰度比值（0.288±0.009、0.309±0.013）显着高于低氧组（P<0.05）;（5）大鼠肺组织存在eNOS蛋白表达。Western-blot结果显示:低氧组eNOS蛋白表达量的灰度比值（0.379±0.108）显着低于对照组（1.231±0.120）（P<0.05）;IPT低剂量和IPT高剂量组eNOS蛋白表达量灰度比值（0.801±0.147、1.227±0.179）则显着高于低氧组（P<0.05）。结论:本研究结果提示肺组织eNOS可能参与HPH的发生发展;长期低氧导致肺血管内皮细胞功能障碍,NO合成减少、eNOS mRNA和蛋白表达下降,而IPT可改善内皮细胞功能障碍,增加eNOS的表达和NO的释放,逆转低氧性肺动脉高压。
王珏[4]（2009）在《埃他卡林对慢性低氧大鼠肺动脉VEGFmRNA和蛋白表达的影响》文中研究说明目的:肺动脉高压（PAH）是一类以肺血管阻力进行性增高为主要特征,最终导致右心衰竭、功能严重受限、死亡的疾病。低氧性肺动脉高压（HPH）是慢性阻塞性肺疾病（COPD）发展为慢性肺源性心脏病的关键环节,基于新型ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林（IPT）能预防和抑制HPH的形成,本实验目的在于探讨慢性低氧对肺动脉VEGF mRNA和蛋白表达的影响,及埃他卡林（IPT）对慢性低氧大鼠肺动脉VEGF表达的作用。方法: SD大鼠置于常压低氧舱（氧浓度为10±0.5%）,每天8小时,每周6天,持续4周,制备HPH模型。36只雄性SD大鼠随机分为对照组（生理盐水5 ml/kg·d灌胃）、HPH模型组（常压低氧+生理盐水5 ml/kg·d灌胃）、IPT组（IPT 1.5 mg/kg·d灌胃+常压低氧）。四周后,测定平均肺动脉压（mPAP）后处死大鼠,分离肺动脉主干,分离出心脏测定右心指数（RV/（LV+S））。肺动脉提取总RNA和总蛋白,用RT-PCR和Western-blot方法检测各组VEGF mRNA和蛋白的表达,用光密度扫描仪半定量分析。结果:（1）HPH模型组大鼠mPAP（35.89±2.26 mmHg）显着高于对照组（18.35±1.48 mmHg, P <0.01）;IPT组mPAP（19.17±1.54 mmHg）明显低于模型组大鼠（P <0.01）;（2）模型组大鼠RV/LV+S（0.352±0.016）显着高于对照组（0.262±0.013, P <0.01）; IPT组RV/LV+S （0.282±0.034）较模型组显着下降（P <0.01）;（3）大鼠肺动脉存在VEGF mRNA表达,HPH模型组VEGF mRNA表达量的灰度比值（0.83±0.02）,显着高于对照组（0.34±0.01, P<0.01）;IPT组灰度比值（0.33±0.02）显着低于模型组（P<0.01）;IPT组与对照组相比稍有差异,但无显着的统计学意义（P>0.05）;（4）大鼠肺动脉有VEGF蛋白表达,HPH大鼠肺动脉VEGF蛋白表达量的灰度比值（0.806±0.025）显着高于对照组（0.413±0.070, P<0.01）;IPT组灰度比值（0.416±0.074）则显着低于HPH模型组（P<0.01）; IPT组与对照组相比稍有差异,但无显着的统计学意义（P>0.05）。结论:本研究结果提示肺动脉VEGF可能参与HPH的发生发展;IPT能明显抑制慢性低氧大鼠肺动脉VEGF mRNA和蛋白表达的上调,从而发挥降低肺动脉压的生物学作用。
朱煜明[5]（2008）在《新型KATP开放剂埃他卡林对人肺动脉收缩与肺动脉平滑肌细胞增殖的影响》文中研究说明缺氧性肺动脉高压（Hypoxic pulmonary hypertension,HPH）作为一类严重危害人类健康的疾病,是慢性阻塞性肺病（Chronicobstructive pulmonary disease,COPD）的重要病理生理过程,也是发展为慢性肺源性心脏病（Chronic cor pulmonale）的关键环节。尽管在过去的十多年中,应用前列环素类药物、磷酸二酯酶-5抑制剂、内皮素受体拮抗剂治疗肺动脉高压已经取得了一定的进展,但由于对HPH的病因和发病机制尚未完全阐明,因而这些治疗并未从根本上治疗肺动脉高压。因此,对缺氧性肺动脉高压形成机制的研究并研发有效的针对致病靶标的防治药物显得尤为必要。近年来,国内外学者已经认识到肺血管平滑肌细胞钾通道在肺动脉高压发生发展中的作用。钾通道功能下降,细胞内K+外流减少,细胞膜去极化,电压依赖性钙通道开放,细胞外Ca2+内流,肌浆网内Ca2+释放,细胞内游离Ca2+浓度增加,肺血管平滑肌细胞收缩、增殖,肺动脉压增高;另一方面肺动脉平滑肌细胞钾通道功能下降,细胞内K+增多,细胞凋亡减少,进一步加重肺血管重构。有鉴于此,钾通道开放剂对肺动脉高压的防治成为近年来国内外研究的热点和焦点。肺血管平滑肌细胞至少存在三种类型钾通道:（1）电压依赖性钾（Kv）通道,（2）Ca2+激活性钾（Kca）通道,（3）ATP敏感性钾(KATP)通道。细胞膜KATP通道是目前已知的唯一的可在机体缺血、缺氧等病理生理情况下代偿性开放的钾通道,是机体对抗缺血缺氧的重要自身保护机制,已经成为研发新型治疗肺动脉高压药物的重要靶标。由于KATP通道调控人类肺动脉平滑肌细胞收缩、增殖的细胞信号及分子机制尚不明确,本文从器官、细胞和分子水平探讨KATP通道调控人肺动脉平滑肌细胞收缩、增殖的细胞和分子生物学机制,系统评价我国学者自行研制的新型KATP开放剂埃他卡林（Iptakalim,IPT）对人肺动脉平滑肌细胞收缩和增殖的影响,为研究开发新型治疗肺动脉高压的药物提供理论依据。本文主要围绕如下三个部分开展工作:第一部分新型KATP开放剂埃他卡林对ET-1诱导的离体人肺动脉环收缩的影响目的:研究IPT对内皮素-1（ET-1）诱导的人离体肺动脉环收缩的影响及其机制。方法:分离正常离体人肺动脉条,置于含饱和混合氧（95%O2和5%CO2混合气）和Krebs-Henseleit（K-H）液(含mol·L-1:NaCl 119,KCl 4.7,MgSO4 0.6,NaHCO3 25,KH2PO4 1.2,CaCl2 2.5和葡萄糖11.1,PH 7.4)的培养皿内,剪取3 mm长的血管环固定于含K-H液的浴槽内,持续小流量通入混合氧,静息张力下稳定60 min后,通过张力换能器与十六道生理记录仪相连,记录血管环的张力变化。按累积法给予7个浓度ET-1(0.05～50 nmol·L-1),观察ET-1收缩血管作用的量效关系,求出EC50;观察ET-1在EC50浓度的时效曲线。在此基础上,以ET-1的EC50浓度使肺动脉环达到最大收缩幅度时,按累积法加入IPT10-13～10-3mol·L-1或Pin10-13～10-3mol·L-1,以等容量溶剂做阴性对照,记录肺血管环收缩张力的变化,并以ET-1最大收缩幅度为100%,计算IPT和Pin的舒张率。结果:在0.05～50nmol·L-1浓度范围内,ET-1呈浓度依赖性地诱导离体人肺动脉环收缩,其EC50±L95为10.19±1.26 nmol·L-1,b±Sb为0.905±0.186,r=0.91。在10-13～10-3nmol·L-1浓度时,IPT呈浓度依赖地拮抗ET-1诱导的离体人肺动脉环收缩,其IC50为27.11 nmol·L-1;Pin同样也呈浓度依赖性拮抗ET-1 10nmol·L-1诱导的动脉收缩,与IPT组比较,二者无显着性差异（P＞0.05）。结论:IPT可拮抗ET-1诱导的人肺动脉环收缩,其机制可能在于开放肺动脉平滑肌细胞上的KATP通道。IPT可以有效舒张人肺动脉,表明其是一个富有潜力的治疗肺动脉高压的候选药物。第二部分新型KATP开放剂埃他卡林对ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响目的:研究IPT对ET-1诱导的原代培养的人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其机制。方法:以原代培养的人肺动脉平滑肌细胞为研究对象,用ET-1诱导人肺动脉平滑肌细胞增殖,3H-胸腺嘧啶核苷（[3H]-TdR）掺入法检测脱氧核糖核苷酸（DNA）合成;流式细胞仪技术检测人肺动脉平滑肌细胞细胞周期。结果:ET-1（10 nM）使原代培养的人肺动脉平滑肌细胞[3H]-TdR掺入量增加,促进细胞由静止期（G0/G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2/M期）;IPT呈浓度依赖性抑制ET-1诱导的[3H]-TdR掺入量增多,阻止人肺动脉平滑肌细胞由静止期（G0/G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2/M期）;Pin同样抑制ET-1诱导的[3H]-TdR掺入量增多和细胞周期的改变,且与IPT比较二者无显着差异;格列本脲呈浓度依赖性地逆转IPT与Pin对细胞增殖的抑制作用。结论:IPT作为一种新型的KATP开放剂,可以抑制人肺动脉平滑肌细胞的增殖,是一种治疗肺动脉高压的侯选药物。第三部分新型KATP开放剂埃他卡林对ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞内[Ca2+]cyt及ERK1/2磷酸化的影响目的:研究IPT对ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]cyt及细胞外信号调节激酶1和2（ERK1/2）磷酸化的影响及其机制。方法:以原代培养的人肺动脉平滑肌细胞为研究对象,分别用ET-1与IPT处理人肺动脉平滑肌细胞后,应用激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内[Ca2+]cyt变化;使用Western blot检测ERK1/2磷酸化水平的改变。结果:ET-1诱导人肺动脉平滑肌细胞内游离Ca2+显着增加,IPT（10μM）拮抗ET-1诱导的人肺动脉平滑肌细胞内[Ca2+]cyt升高;ET-1促使人肺动脉平滑肌细胞的ERK1/2磷酸化,且磷酸化ERK1/2水平在加入ET-1后10 min达高峰,IPT呈浓度依赖性抑制ET-1诱导的肺动脉平滑肌细胞的ERK1/2磷酸化。结论:IPT作为一种特异性KATP开放剂,可能通过增强KATP通道的功能与通道蛋白的表达,使细胞内游离Ca2+减少,进而抑制丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）的活化,最终导致肺动脉平滑肌舒张并抑制平滑肌细胞的增殖。综合本文三个部分的研究结果,获得如下结论:1.IPT通过开放肺动脉平滑肌细胞上的KATP通道,拮抗ET-1诱导的人肺动脉环收缩,有效舒张人肺血管;2.IPT抑制细胞DNA合成,阻止细胞由静止期（G0/G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2/M期）,抑制人肺动脉平滑肌细胞的增殖;3.IPT通过增强KATP通道的表达,使细胞内游离Ca2+减少,进而抑制ERK1/2的磷酸化。4.总之,新型KATP开放剂IPT在整体、细胞、分子水平抑制人肺动脉环的收缩与肺动脉平滑肌细胞增殖,是一个富有潜力的防治肺动脉高压的候选药物。
王虹,解卫平,齐栩,汪海,胡刚[6]（2007）在《新型ATP敏感性钾通道开放剂Iptakalim对慢性缺氧大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响》文中研究表明目的探讨慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞外向性钾电流的影响,及新型ATP敏感性钾（KATP）通道开放剂Iptakalim对此时钾电流的作用。方法SD雄性大鼠28只随机分成正常组、缺氧组[O2（10±0.5）%]、低剂量治疗组（每日缺氧前30min Iptakalim0.75mg·kg-1灌胃）、高剂量治疗组（每日缺氧前30min Iptakalim1.5mg·kg-1灌胃）,将缺氧组和已灌胃的大鼠放入常压缺氧舱制作动物模型。4周后,急性分离大鼠动脉平滑肌细胞,用膜片钳全细胞记录技术记录细胞外向性钾电流;通过浴槽内给药,观察Iptakalim对钾电流的影响。结果Iptakalim0.1,1,10,100μmol/L呈浓度依赖性增加正常大鼠肺内动脉平滑肌外向钾电流,格列本脲30μmol/L可拮抗Iptakalim10μmol/L对钾电流的增强作用;与对照组大鼠相比,慢性缺氧大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流下降,电流密度减小（690±450）pA/pFvs（420±250）pA/pF（P<0.01）,膜电容增大到（4.29±1.78）pF（P<0.01）,电流-电压（I-V）曲线下移;与缺血氧组相比,每日缺氧前口服Iptakalim,细胞膜电容减小为（3.09±1.71）（P<0.01）,电流密度增大到（610±320）pA/pF（P<0.01）。结论慢性缺氧抑制大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾通道,灌服Iptakalim可拮抗慢性缺氧对KATP通道的抑制作用。
姜雨鸽,徐龙河,米卫东,汪海[7]（2006）在《肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究》文中指出目的:观察肾性高血压大鼠（RHR）肺动脉平滑肌细胞膜电容（Em）、膜电流（I）、电流密度（pA/pF）、膜电位和I-V曲线的变化及盐酸埃他卡林对正常血压及肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌钾通道的影响。方法:用内径为0.20.3 mm的银夹夹住大鼠左肾肾动脉起始部,制成两肾一夹RHR模型,血压以无创性套尾法测量。急性分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞,用全细胞记录技术记录细胞钾电流、膜电容并计算电流密度。结果:RHR肺动脉平滑肌细胞膜电容均值为（3.43±1.16）pF,比正常血压大鼠（NTR,4.98±0.62pF）降低31.1%;钾电流值为（0.54±0.26）nA,比正常大鼠（1.70±0.67nA）降低68.2%;电流密度值为（180±90）pA/pF,比正常大鼠（350±80 pA/pF）降低48.6%;膜电位为（-26.96±7.23）mV,比正常大鼠（-27.66±7.1 mV）降低2.5%。盐酸埃他卡林在0.1-100μmol.L-1浓度下,可显着增强正常血压大鼠动脉平滑肌钾电流;在1.0-100μmol.L-1浓度下,可显着增强肾性高血压大鼠动脉平滑肌钾电流。结论:RHR的膜电容、膜电流、电流密度比正常血压大鼠低,I-V曲线下移。盐酸埃他卡林对正常血压大鼠及肾性高血压大鼠动脉平滑肌钾电流都有增强作用。
姜雨鸽,徐龙河,张宏,汪海[8]（2006）在《肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究》文中提出目的:观察肺动脉高压大鼠（PHR）肺动脉平滑肌细胞膜电容（Cm）、膜电流（I）、电流密度（pA/pF）及I-V曲线,并与正常SD大鼠进行比较。观察盐酸埃他卡林对正常血压及肺动脉高压大鼠动脉平滑肌钾通道的影响。方法:SD大鼠,置于常压缺氧（10%O2）舱内,每天6 h,每周6 d,持续4周,使之平均肺动脉压升高,建立肺动脉高压大鼠模型。急性分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞,用全细胞记录（whole cell record ing）技术记录细胞钾电流、膜电容并计算电流密度。结果:PHR肺动脉平滑肌细胞Cm值、细胞膜钾电流值均显着高于正常血压SD大鼠（P<0.05）;PHR肺动脉平滑肌细胞钾电流密度值显着低于正常血压大鼠（P<0.05）。与正常SD大鼠比较,PHR钾电流I-V曲线下移。盐酸埃他卡林在10μmol.L-1浓度下,可显着增强正常血压SD大鼠及PHR动脉平滑肌钾电流（P<0.05）。结论:PHR肺动脉平滑肌细胞的膜电容、膜钾电流比正常血压SD大鼠高;钾电流密度比正常血压SD大鼠低,I-V曲线下移。盐酸埃他卡林对正常血压大鼠及肺动脉高压大鼠动脉平滑肌钾电流都有增强作用。
吕昌迎[9]（2006）在《肾脏缺血再灌注损伤及其实验治疗学研究》文中提出急性肾功能衰竭（ARF）是临床上的危重症，发病率很高（成人约200／百万·年），其中住院病人的5％到30～50％住入ICU病房，尽管目前治疗技术有了明显的进步，但是ARF的发病率和死亡率仍然很高，近40年来未明显降低。其中缺血再灌注损伤（IRI）是引起自身和移植肾脏发生ARF的主要原因之一，导致肾脏IRI的原因有心血管疾病、脓毒症、创伤、休克、脱水及外科手术等。此外，缺血再灌注损伤在移植器官发生急性排斥反应和器官功能丧失等方面有着重要意义，可以明显增加其危险性，导致移植肾脏出现延迟功能衰竭。近年来随着各种脏器尤其肾脏移植手术的增加，肾脏缺血再灌注损伤的发病率明显增加．说明临床上缺乏有效防治缺血性急性肾功能衰竭的药物，因此研究对缺血再灌注性肾损伤有预防或治疗作用的药物具有重要的临床意义。本研究在以往系列研究的基础上，以缺血再灌注。肾脏损伤大鼠为模型，观察药物对肾脏缺血再灌注损伤的实验预防治疗学作用及其可能的作用机制。 一、 肾脏缺血再灌注模型的建立及中药的初步筛选 1、雄性Wistar大鼠麻醉后切除其右侧肾脏，恢复两周后，常规消毒麻醉，左侧腹部切口，分离左肾动静脉。假手术组（Sham）只在左肾动静脉处穿线不夹闭，缺血组（Isc）用无创动脉夹夹闭左肾动静脉45min造成急性缺血，缺血再灌注组（I／R）用无创动脉夹夹闭左肾动静脉45min后再放开24小时造成急性缺血再灌注肾损伤大鼠模型。 2、应用缺血再灌注模型对3种中药进行初步筛选，实验大鼠分为I／R组、1号药、2号药、3号药组，检测再灌注24小时时肾功能情况，2、3号药能够明显改善肾功能，与I／R组比较差别有统计学意义；1号药虽然也能降低血清尿素氮、肌酐水平，但是与I／R组比较，差别无统计学意义。因此，淘汰1号药，对2、3号药继续进一步研究 二、中药对缺血再灌注肾脏损害的作用 1．中药对缺血再灌注肾脏损害的保护作用 本实验以缺血再灌注肾脏损伤大鼠为模型，从整体水平观察中药对缺血再灌注肾脏损害的实验预防治疗学效果，从组织细胞水平观察药物对肾组织细胞增生、凋亡以及ET-1系统表达的影响。实验设计假手术组、缺血再灌注模型组、中药2号、3号组，
陈玉萍[10]（2006）在《埃他卡林对ATP敏感性钾通道选择性作用的研究》文中认为ATP敏感性钾通道（ATP-sensitive potassium channels，KATP channels）是细胞膜上偶联细胞兴奋性和能量代谢的一类重要分子，具有重要的生理学和病理生理学功能。KATP在体内广泛分布，心肌、平滑肌（包括血管、呼吸道、泌尿道、消化道平滑肌）、骨骼肌、神经元、腺体（胰腺）等组织均有功能性KATP的存在。然而正是由于KATP分布的广泛性，目前临床使用的钾通道开放剂（KCOs），在靶向KATP产生治疗作用的同时，因其组织选择性不理想，产生一系列副反应，大大局限了其临床应用。因此，研发组织选择性强KCOs具有重要价值。事实上，不同组织KATP分子结构和功能特征存在差异。分子生物学研究表明KATP是由内向整流钾通道（inward rectifier potassium channel，Kir）和ATP结合盒（ATP-binding-cassette，ABC）超家族成员磺酰脲类受体（sulfonylurea receptor，SUR）两类亚基构成。Kir和SUR不同亚型在不同组织中分布不同。对比克隆表达和天然型KATP特性表明，胰腺β细胞和脑多巴胺能神经元KATP由Kir6.2和SUR1组成，心肌和骨骼肌KATP由Kir6.2和SUR2A组成，血管平滑肌则为Kir6.1和SUR2B。因此，基于KATP分子结构的差异性和其组织分布的特异性，使得研究组织选择性强的KCOs成为可能。 埃他卡林是我国学者自主研发的、一类具有新化学结构的以KATP通道为靶标的新型KCO。前期的研究表明埃他卡林具有独特的药理学和治疗学优势，其组织选择性作用特征不同于并显着优于其他结构类型的KCOs，有望发展为一类新型抗高血压药物应用于临床。本研究旨在进一步明确埃他卡林对KATP组织选择性作用的分子基础，深入认识其在KATP上的作用靶点，探讨埃他卡林衍生物与钾通道调节作用之间构效关系。这对于认识埃他卡林不同于其他KCOs的
二、盐酸埃他卡林对正常大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、盐酸埃他卡林对正常大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响（论文提纲范文）
（1）埃他卡林对体循环、脑循环、肺循环微动脉内皮细胞SUR2B/Kir6.1通道的激活作用及能量代谢物质的调节作用（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 埃他卡林对体循环微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道的激活作用及其药理学特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 药品配置 |
| 1.4 耗材与仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 肠系膜微动脉平滑肌细胞的急性分离 |
| 2.2 肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流记录 |
| 2.3 大鼠肠系膜微动脉内皮细胞的原代培养 |
| 2.4 大鼠肠系膜微动脉内皮细胞特性及纯度鉴定 |
| 2.5 大鼠肠系膜微动脉内皮细胞K_(ATP)电流记录 |
| 3 数据分析与统计方法 |
| 结果 |
| 1 埃他卡林激活SUR 2B/Kir 6.1 通道体内研究的证据 |
| 1.1 大鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞的形态学观察 |
| 1.2 Kir 6.1 基因敲除小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞的形态学观察 |
| 1.3 埃他卡林对大鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流的影响 |
| 1.4 埃他卡林对Kir 6.1 基因敲除小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流的影响 |
| 1.4.1 埃他卡林对野生型(WT)小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流的影响 |
| 1.4.2 埃他卡林对杂合子(Kir 6.1~(+/-))小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流的影响 |
| 1.4.3 埃他卡林对纯合子(Kir 6.1~(-/-))小鼠肠系膜微动脉平滑肌细胞K_(ATP)电流的影响 |
| 2 埃他卡林对肠系膜微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道的激活作用及其药理学特征 |
| 2.1 大鼠肠系膜微动脉内皮细胞的观察与鉴定 |
| 2.2 胞内能量代谢物质对埃他卡林开放大鼠肠系膜微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道作用的影响 |
| 2.2.1 胞内ATP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.2.2 胞内ADP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.2.3 胞内UDP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.2.4 胞内ATP水解以及镁离子存在对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 第二章 埃他卡林对脑循环微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道的激活作用及其药理学特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 药品配置 |
| 1.4 耗材与仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 大鼠脑微动脉内皮细胞的原代培养 |
| 2.2 大鼠脑微动脉内皮细胞特性及纯度鉴定 |
| 2.3 大鼠脑微动脉内皮细胞K_(ATP)电流记录 |
| 3 数据分析与统计方法 |
| 结果 |
| 1 大鼠脑微动脉内皮细胞的观察与鉴定 |
| 2 胞内能量代谢物质对埃他卡林开放大鼠脑微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道作用的影响 |
| 2.1 胞内ATP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.2 胞内ADP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.3 胞内UDP浓度对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 2.4 胞内ATP水解以及镁离子存在对埃他卡林开放K_(ATP)电流作用的影响 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 第三章 埃他卡林对肺循环微动脉内皮细胞SUR 2B/Kir 6.1 通道的激活作用及其药理学特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 药品配置 |
| 1.4 耗材与仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 大鼠肺微动脉内皮细胞的原代培养 |
| 2.2 大鼠肺微动脉内皮细胞特性及纯度鉴定 |
| 2.3 大鼠肺微动脉内皮细胞K_(ATP)电流记录 |
| 3 数据分析与统计方法 |
| 结果 |
| 1 大鼠肺微动脉内皮细胞的观察与鉴定 |
| 2 胞内能量代谢物质对埃他卡林开放大鼠肺微动脉内皮细胞K_(ATP)功能的影响 |
| 2.1 胞内ATP浓度对埃他卡林激活K_(ATP)作用的影响 |
| 2.2 胞内ADP浓度对埃他卡林激活K_(ATP)作用的影响 |
| 2.3 胞内UDP浓度对埃他卡林激活K_(ATP)作用的影响 |
| 2.4 胞内ATP水解以及镁离子存在对埃他卡林激活K_(ATP)作用的影响 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| ATP 敏感性钾通道在心血管疾病中的作用 |
| 参考文献 |
| 简历 |
| 致谢 |
（2）埃他卡林选择性抗高血压作用分子机制的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 埃他卡林抗高血压机制的选择性扩血管作用特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2 . 1 氯化钾致大鼠肠系膜微动脉预收缩模型实验 |
| 2.2 大鼠阻力血管压力超负荷模型实验 |
| 2.3 结果处理与统计分析 |
| 实验结果 |
| 1 埃他卡林抗高血压机制的选择性扩血管作用特征 |
| 1.1 埃他卡林对氯化钾致预收缩大鼠肠系膜微动脉舒张作用特征 |
| 1.2 埃他卡林对压力超负荷大鼠不同组织、不同管径及不同灌注压微动脉扩张作用特征 |
| 2 埃他卡林与吡那地尔、氨氯地平、硝苯地平、氢氯噻嗪对大鼠系膜微动脉扩张作用特征的比较 |
| 3 高血压状态埃他卡林的扩血管作用特征 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 埃他卡林选择性扩血管作用内皮依赖性分子途径的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 1 埃他卡林选择性扩血管内皮依赖性扩张作用特征 |
| 1.1 埃他卡林对氯化钾致预收缩阻力血管内皮依赖性扩张作用 |
| 1.2 埃他卡林对压力超负荷阻力血管内皮依赖性扩张作用 |
| 2 埃他卡林选择性扩血管作用内皮依赖性分子途径的研究 |
| 2.1 前列环素通路对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 2.2 内皮源性舒张因子对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 2.3 内皮源性超级化因子对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 2.4 内皮源性舒张因子联合内皮源性超级化因子对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 埃他卡林选择性扩血管作用分子靶标的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 1 不同钾离子通道抑制剂对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 2 ATP 敏感性钾离子通道抑制剂对埃他卡林选择性扩血管作用的影响 |
| 3 埃他卡林选择性扩血管作用分子靶标的研究 |
| 3.1 埃他卡林对 Kir6.1-/ -小鼠阻力血管扩张作用特征 |
| 3.2 埃他卡林选择性扩血管作用分子靶标的研究 |
| 4 埃他卡林对不同管径血管扩张作用分子靶标的研究 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（3）埃他卡林对长期低氧大鼠肺组织eNOSmRNA和蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 中英文对照表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 研究生期间发表的论文 |
| 致谢 |
（4）埃他卡林对慢性低氧大鼠肺动脉VEGFmRNA和蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 中英文对照表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 分析与讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）新型KATP开放剂埃他卡林对人肺动脉收缩与肺动脉平滑肌细胞增殖的影响（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 新型K_(ATP)开放剂埃他卡林对ET-1诱导的离体人肺动脉环收缩的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 新型K_(ATP)开放剂埃他卡林对ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 新型K_(ATP)开放剂埃他卡林对ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞内[Ca~(2+)]_(cyt)及ERK1/2磷酸化的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综合讨论 |
| 一、ET-1在缺氧性肺动脉高压形成中的作用及其机制 |
| 二、钾通道在缺氧性肺动脉高压形成中的作用及其机制 |
| 三、新型K_(ATP)开放剂埃他卡林对人肺动脉平滑肌细胞收缩和增殖的影响及其机制 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
（8）肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究（论文提纲范文）
| 材 料 和 方 法 |
| 1肺动脉高压大鼠模型的建立[2, 3] |
| 2 肺动脉平滑肌细胞分离 |
| 3 全细胞记录 |
| 4 统计学处理 |
| 结 果 |
| 1 肺动脉高压模型的鉴定 |
| 2 膜电容、细胞膜外向钾电流及钾电流密度的变化 |
| 3 PHR与正常血压大鼠I-V曲线的比较 |
| 4 盐酸埃他卡林对正常血压大鼠动脉平滑肌钾电流的影响 |
| 讨 论 |
（9）肾脏缺血再灌注损伤及其实验治疗学研究（论文提纲范文）
| 缩写与略语 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 肾脏缺血再灌注模型的建立及中药筛选的初步的研究 |
| 一、动物模型的建立 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 结论 |
| 二、中药的初步筛选 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 结论 |
| 结语 |
| 第二部分 中药对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用的研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 结语 |
| 讨论 |
| 第三部分 埃他卡林对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用的研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 结语 |
| 讨论 |
| 研究总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 文献综述 |
| 1.埃他卡林对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 2.中性粒细胞明胶酶相关脂笼蛋白与肾脏缺血性损伤 |
（10）埃他卡林对ATP敏感性钾通道选择性作用的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 1.HEK-293细胞的培养 |
| 2.ATP敏感性钾通道亚型在HEK-293细胞中的瞬时表达 |
| 3.成年大鼠尾动脉平滑肌的分离 |
| 4.免疫组织化学实验 |
| 5.全细胞膜片钳实验 |
| 6.荧光强度的测定 |
| 7.数据分析与统计处理 |
| 实验结果 |
| 一、ATP敏感性钾通道在HEK-293细胞中的瞬时表达 |
| 1.Kir6.x／SURcDNA测序 |
| 2.HEK-293细胞上表达Kir6.x／SUR通道蛋白的鉴定 |
| 3.HEK-293细胞中表达K_(ATP)通道功能的鉴定 |
| 结语 |
| 二、埃他卡林对K_(ATP)通道亚型的选择性作用 |
| 1.埃他卡林对表达K_(ATP)通道细胞上DiBAC4(3)产生荧光强度的影响 |
| 1.1 埃他卡林对表达Kir6.1／SUR2B通道荧光强度的影响 |
| 1.2 埃他卡林对表达Kir6.2／SUR2A通道荧光强度的影响 |
| 1.3 埃他卡林对表达Kir6.2／SUR1通道荧光强度的影响 |
| 2.膜片钳技术研究埃他卡林对表达K_(ATP)通道电流的影响 |
| 2.1 埃他卡林对表达Kir6.1／SUR2B通道电流的影响 |
| 2.2 埃他卡林对表达Kir6.2／SUR2A通道电流的影响 |
| 2.3 埃他卡林对表达Kir6.2／SUR1通道电流的影响 |
| 2.4 埃他卡林激活Kir6.1／SUR2B通道量效关系的研究 |
| 2.5 埃他卡林激活Kir6.2／SUR2A通道量效关系的研究 |
| 结语 |
| 三、埃他卡林对K_(ATP)通道亚单位的选择性作用 |
| 1.埃他卡林对表达Kir6.2△C36通道的影响 |
| 2.比较埃他卡林对Kir和SUR亚单位的选择性 |
| 3.比较埃他卡林对SUR亚型的选择性 |
| 结语 |
| 四、埃他卡林新衍生物激活K_(ATP)通道构效关系的研究 |
| 1.新衍生物对尾动脉平滑肌钾通道的调节作用的筛选 |
| 1.1 动脉平滑肌细胞外向钾电流的特征 |
| 1.2 埃他卡林新衍生物对钾电流的影响 |
| 1.3 埃他卡林新衍生物构效关系分析 |
| 1.4 格列苯脲对活性化合物诱发外向钾电流的拮抗作用 |
| 2.活性化合物K_(ATP)通道亚型的选择性作用的筛选 |
| 2.1 活性化合物对表达Kir6.1／SUR2B通道荧光强度的影响 |
| 2.2 活性化合物对表达Kir6.2／SUR2A通道荧光强度的影响 |
| 2.3 活性化合物对表达Kir6.2／SUR1通道荧光强度的影响 |
| 2.4 活性化合物对K_(ATP)通道亚型的选择性作用的分析 |
| 结语 |
| 讨论 |
| 一、埃他卡林对K_(ATP)通道亚型的选择性作用 |
| 二、埃他卡林对K_(ATP)通道亚单位的选择性作用 |
| 三、埃他卡林新衍生物激活K_(ATP)通道构效关系的研究 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 发表论文 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
四、盐酸埃他卡林对正常大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响（论文参考文献）
- [1]埃他卡林对体循环、脑循环、肺循环微动脉内皮细胞SUR2B/Kir6.1通道的激活作用及能量代谢物质的调节作用[D]. 王苏阳. 中国人民解放军军事医学科学院, 2016(11)
- [2]埃他卡林选择性抗高血压作用分子机制的研究[D]. 黄景慧. 中国人民解放军军事医学科学院, 2013(11)
- [3]埃他卡林对长期低氧大鼠肺组织eNOSmRNA和蛋白表达的影响[D]. 王慧. 南京医科大学, 2010(02)
- [4]埃他卡林对慢性低氧大鼠肺动脉VEGFmRNA和蛋白表达的影响[D]. 王珏. 南京医科大学, 2009(02)
- [5]新型KATP开放剂埃他卡林对人肺动脉收缩与肺动脉平滑肌细胞增殖的影响[D]. 朱煜明. 南京医科大学, 2008(12)
- [6]新型ATP敏感性钾通道开放剂Iptakalim对慢性缺氧大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响[J]. 王虹,解卫平,齐栩,汪海,胡刚. 国际呼吸杂志, 2007(09)
- [7]肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究[J]. 姜雨鸽,徐龙河,米卫东,汪海. 中国应用生理学杂志, 2006(03)
- [8]肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究[J]. 姜雨鸽,徐龙河,张宏,汪海. 中国病理生理杂志, 2006(08)
- [9]肾脏缺血再灌注损伤及其实验治疗学研究[D]. 吕昌迎. 中国人民解放军军事医学科学院, 2006(12)
- [10]埃他卡林对ATP敏感性钾通道选择性作用的研究[D]. 陈玉萍. 中国人民解放军军事医学科学院, 2006(12)